三种不同梅毒抗体检测方法在临床中的应用

７４０　实用医学杂志２００７年第２３卷第５期　三种不同梅毒抗体检测方法在临床中的应用　邹享珍　摘要　目的：比较三种不同梅毒血清学实验方法在临床中的应用价值。方法：应用甲苯胺红不加热血清试　验（ＴＲＵＳＴ）、梅毒螺旋体明胶凝集试－￣（ＴＰＰＡ）、梅毒酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清标本中的梅毒螺旋体抗　体。结果：ＴＲＵＳＴ、　ｒＰＰＡ、ＥＵＳＡ的阳性率分别为８６．７％、９８－３％、９８．９％。特异性分别为７８．９％、９６．６％、９０．９％。同时　发现ＥｕＳＡ检测时存在假阳性。结论：　ｒＲｕｓＴ不适合梅毒的诊断。ＥｕＳＡ可作为输血和手术前检测的一种理想筛　查方法，但对ＥＵｓＡ阳性标本应做１１ＰＰＡ检测，对ＥＵｓＡ检测阴性的标本则不需１１ＰＰＡ确诊。　关键词梅毒酶联免疫吸附测定梅毒螺旋体明胶凝集试验甲苯胺红不加热血清试验　梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种危害人类健康　的性传播疾病，它几乎可以累及全身各个器官，病程　长，危害大，临床表现复杂，呈多样性，很容易漏诊和　误诊。为提高梅毒的诊断率，我们对甲苯胺红不加热　血清试验（ＴＲＵＳＴ）、梅毒螺旋体明胶凝集试验　（ＴＰＰＡ）、梅素酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）三种不同梅　毒检测方法进行比较。并建立了本实验室的检测和报　告系统。现报告如下。　１材料与方法　假阴性为１．１％，ＴＰＰＡ的假阴性为１．７％。见表１。　１．１　血清标本２００５年８月至２００６年８月收集的　１８０例经临床确诊的梅毒患者均为我院门诊和住院　病人，其中Ｉ期５８例，Ⅱ期１２２例。１５５例非梅毒患　者均为我院住院病人，其中系统性红斑狼疮患者２５　２．２三种方法检测１７５例非梅毒者血清结果１７５例　非梅毒者其中ＴＰＰＡ阳性６例，阴性１６９例；ＥＬＩＳＡ阳　性１６例，阴性１５９例；ＴＲＵＳＴ阳性３７例，阴性１３８例。　ＴＲＵＳＴ的特异性为７８．９％，ＥＬＩＳＡ的特异性为９０．９％。　ＴＰＰＡ的特异性为９６．６％。　２－３　ＥＬＩＳＡ与ＴＰＰＡ两种特异性方法检测结果比较　对１３３例ＥＬＩＳＡ阳性标本和１５０例ＥＬＩＳＡ阴性标　本进行ＴＰＰＡ检测。发现存在８例ＥＬＩＳＡ阳性而　ＴＰＰＡ阴性。但不存在ＴＰＰＡ阳性而ＥＬＩＳＡ阴性的标　本。见表２。　表２　ＥＬＩＳＡ法与ＴＰＰＡ法检测比较　例　例，妊娠孕妇２４例，肝炎患者２５例，类风湿性关节炎　１８例，脑血栓２５例，冠心病２０例，肿瘤１８例。正常　人２０例。　１．２器材ＴＲＵＳＴ试剂由上海荣盛生物技术有限公　司提供。ＴＰＰＡ试剂由日本富士瑞必欧株式会社公司　提供。ＥＬＩＳＡ试剂由中山生物工程有限公司提供。上　述试剂均在有效期内使用。仪器：酶标仪、洗板机、振　荡器。　１．３方法严格按照试剂盒说明书进行操作，对不　确定的标本进行重复检测。　２结果　３讨论　２．１　三种方法检测１８０例梅毒血清抗体结果其中　ＴＲＵＳＴ有１５６例阳性，阳性率为８６．７％。ＥＬＩＳＡ有　１７８例阳性。阳性率为９８．９％。ＴＰＰＡ有１７７例阳性，阳　性率为９８．３％。ＴＲＵＳＴ的假阴性为１３．３％，ＥＬＩＳＡ的　表１三种方法检测１８０例梅毒患者血清　梅毒抗体结果　例（％）　本研究采用三种检测梅毒抗体的方法，其中　ＴＲＵＳＴ为非特异性试验。主要测定血清中的心磷脂抗　体。梅毒感染发病该抗体可呈阳性治愈后为阴性。本　研究结果显示Ｉ期梅毒的检出率为７５．９％，与文献［　】　报道一致。Ⅱ期梅毒的敏感性较高，本组为９１．８％，但　其特异性为７８．９％，远低于ＥＬＩＳＡ和ＴＰＰＡ的特异　性．而且该法易受其他因素干扰，有类风湿性关节炎、　系统性红斑狼疮等疾病时出现假阳性，有时还会出现　前滞现象　。　因此笔者认为ＴＲＵＳＴ不适合梅毒的诊　断．但可作为抗梅毒的疗效观察及判愈　。　ＴＰＰＡ法和ＥＬＩＳＡ法是梅毒的特异性试验。ＴＰＰＡ　为近年来临床常用的梅毒确诊实验，具有很高的特异　性和灵敏度。它是将提纯的梅毒螺旋体特异性抗原包　被在明胶颗粒上，当抗原与血清中的抗体发生特异性　反应时就会出现颗粒凝集现象，凝集的强弱与抗体浓　度成正相关。本研究测定显示ＴＰＰＡ的敏感性为　９８．３％．特异性为９６．６％，与文献［　】报道相一致，但笔　作者单位：５２３６３３广东省东莞市樟木头人民医院　维普资讯 http://www.cqvip.com

实用医学杂志２００７年第２３卷第５期　７４１　者认为１１ＰＰＡ操作较复杂，试剂昂贵，结果判断难以　自动化，不适合大规模的血液筛查。　ＥＬＩＳＡ是利用重组梅毒螺旋体的特异性抗原包　被酶标板孔，并采用双抗原夹心法检测血清标本中的　梅毒特异性抗体，对梅毒各期的检出率都较高。本研　究表明ＥＬＩＳＡ有很高的敏感性和特异性，分别为　９８．９％和９０．９％，与１１ＰＰＡ非常接近。而ＥＬＩＳＡ操作标　准简便，通过酶标仪可直接读取数据，克服了肉眼难　以判断结果的缺点，减少了人为操作和判断失误，价　格适中，而且本研究证实不存在ＥＬＩＳＡ阴性而ＴＰＰＡ　阳性的标本，即ＥＬＩＳＡ的假阴性率很低，本研究的假　阴性率仅为１．１％，与文献［ｓ】报道基本一致。因而笔者　认为ＥＨＳＡＳ适合手术前检查和输血等大批量样本　的筛查试验。　ＴＰＰＡ和ＥＬＩＳＡ两种特异性方法的比较：对１３３　例ＥＬＩＳＡ阳性和１５０例ＥＬＩＳＡ阴性的标本进行　１１ＰＰＡ检测时发现８例ＥＬＩＳＡ阳性而ＴＰＰＡ阴性，并　对８例患者进行临床追踪调查，发现３例为肝炎，２　例为妊娠孕妇，１例为肿瘤，２例为类风湿性关节炎，　没有梅毒患者。这表明ＥＬＩＳＡ法存在假阳性，但没有　发现ＥＨＳＡ阴性而ＴＰＰＡ阳性的标本。因此笔者认为　对手术前检查和输血等大批量样本的筛查试验时，若　ＥＬＩＳＡ检测为阳性时应进一步做１１ＰＰＡ确认，而对　ＥＬＩＳＡ检测阴性的标本不需要再做１１ＰＰＡ确认。　通过上述三种方法的比较，笔者认为ＴＲＵＳＴ与　ＥＬＩＳＡ、１１ＰＰＡ是不同的检测方法，特异性和敏感性与　ＥＬＩＳＡ、ＴＰＰＡ无可比性。但ＴＲＵＳＴ可判断梅毒患者的　病情，而ＥＬＩＳＡ、１１ＰＰＡ不适合对梅毒病情的判断。因　而临床医生应根据病人不同情况开不同的检查单，避　免增加病人的经济负担。　梅毒检测各种方法操作较简单．各级医院均可开　展．而且每所医院实验室同时可开展多种检测方法，　为了避免梅毒的漏报和误报，避免同一病人在同一实　验室出现不同的实验结果，我们建议每个实验室都应　建立一套完整的、统一的梅毒实验室报告系统。　４参考文献　［１］程艳杰，王广杰，王旭，等．梅毒螺旋体血清学检测方法的实验　室评价［Ｊ］．中国皮肤性病学杂志，２００５，１９（８）：５０４．　［２］周萍．不同检测方法对梅毒检测结果比较［Ｊ］．淮海医药，２００５，　２３（１）：２７．　［３］何浩明，姜建平，秦建萍．现代检验医学与临床［Ｍ］．上海：同　济大学出版社，２００１：２６４．　［４］程艳杰，王广杰，王旭，等．梅毒螺旋体血清学检测方法的实验　室评价［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００６，２９（３）：２７２．　［５　３刘保林．ＥＬＩＳＡ与ＲＰＲ法检测梅毒抗体结果分析［Ｊ］．中国误诊　学杂志，２００５，５（１３）：２４９３—２４９４．　（收稿：２００６—０９—１５修回：２００６—１０—１８）　ＥＬＩＳＡ检测甲胎蛋白结果判定中应注意的问题及对策　孙子涵　齐法莲摘杜秀敏徐军　克丙中　要　目的：探讨甲胎蛋白（ＡＦＰ）在ＥＬＩＳＡ检测结果判定中应注意的问题及对策，以提高报告结果的可靠　性及准确性。方法：５４２例患者首先采用ＥＬＩＳＡ法进行ＡＦＰ定性筛查，检出的阳性及临床怀疑与肝脏有关的阴性　患者．采用电化学发光法进行定量测定。结果：５４２例患者中，ＥＬＩＳＡ法定性检测ＡＦＰ阳性者为４１７例，电化学发光　法定量测定阳性者３７０例；１２５例阴性患者中有４８例定量为阳性。结论：对ＥＬＩＳＡ定性检测ＡＦＰ阳性及高度怀疑　肝脏病变的阴性患者．建议追加定量分析，以排除假阳性或假阴性结果。　关键词　甲胎蛋白类酶联免疫吸附测定电化学发光法　甲胎蛋白（ＡＦＰ）是哺乳动物胚胎期肝脏卵黄囊　合成的一种糖蛋白，是辅助诊断原发性肝癌（ＨＣＣ）　最常用的检测指标。目前检测ＡＦＰ的方法较多，有　放射免疫法、荧光免疫法、酶联免疫法、电化学发光　法、蛋白质芯片等［】＿　。ＥＬＩＳＡ法定性检测ＡＦＰ以其　快速、简便、实效的优势在各级医院应用较广，但　ＥＬＩＳＡ法的影响因素较多．有时可出现假阳性或假　阴性结果，为使ＡＦＰ检测结果更加准确可靠，我们对　５４２例ＡＦＰ标本的定性检测结果进行了分析，报告　如下。　作者单位：２５００３１济南军区总医院实验诊断科　１材料与方法　１．１检测对象本院门诊及住院病人，共５４２例，男　３７０例，女１７２例，年龄２２～７８岁，均为已知肝占位性　病变、肝癌术后或肝胆消化系统疾病及各种肿瘤患　者。　１．２方法采用ＥＬＩＳＡ一步法，严格按照试剂盒说　明书操作，反映终止后用酶标仪比色，标本ＯＤ值高　于阳性判断值（ｃｕｔ．ｏｆｆ值）判为阳性，低于ｃｕｔ．ｏｆｆ值判　为阴性。定量检测采用电化学发光法，高于参考值　（７．０２　ｎｇ／ｍＬ）者判为阳性。由于检测方法不同，参考　值亦不相同。　为便于分析，根据ＥＬＩＳＡ定性结果分组：ＡＦＰ阳