和酶标记的甲型肝炎病毒抗体（抗HAV-HRP）及其它试剂，采用捕获法原理，检测人血清或血浆中的抗-HAV-IgM。 3． 试剂：上海科华生物工程股份有限公司 组分名称 HAV-IgM微孔板 HAV-IgM酶标记抗体 数量 1块 1支 规格 48T×1 3.2mL 1.0mL 2.2 mL 组分名称 底物A 底物B 封口膜 浓缩洗涤液 说明书 数量 1支 1支 3张 1支 1份 规格 4.0 mL 4.0 mL 3.5 mL 30 mL HAV-IgM阳性对照血清 1支 HAV-IgM阴性对照血清 1支 甲肝抗原 自封袋 1支 1个 1 .0mL 终止液（2MH2SO4） 1支 4． 操作： 4.1 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有结晶析出应充分溶解）浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 4.2 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。 4.3 加样：待测样本用生理盐水作1：1000稀释，每个样本检测孔加入稀释样本100 uL。设阴阳对照各1孔，每孔加入100 uL，并设空白对照1孔。 4.4 温育：置37℃温育20分钟，室温平衡2分钟。 4.5 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。 4.6 加抗原、酶：每孔加入抗原（HAV-Ag）30 uL、酶标记抗体50uL（1滴），充分混匀。 4.7 温育：置37℃温育20分钟。 4.8 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。 4.9 显色：每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 4.10 终止：每孔加终止液50uL，混匀。 4.11 测定：用酶标仪单波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定需设定空白对照一孔，30分钟完成测定，并记录结果）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第21页共99页 5. 结果判定： 5.1 临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD均值N×2.1 阴性对照OD值低于0.050←0.050计算，高于0.050按实际OD值计算。 5.2结果判定：样品OD值S/C.O.≥1者为HAV-IgM阳性 样品OD值S/C.O.＜1者为HAV-IgM阴性 5.3 失效：如果阳性对照OD均值小于0.05，则表明不正常的操作或试剂盒已变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂盒重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。 6. 标本： 6.1 静脉抽取空腹患者标本3.0 mL（真空管采血），将血液放置水浴箱中30分钟后，分离血清。 6.2 溶血标本不能用于检测。 6.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 6.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 7. 注意事项 7.1 本试剂盒仅用于体外诊断试验.进用于人血清或血浆样本,其它体液和样品可能得不到准确的结果. 7.2 请勿使用溶血标本.样本加样量对本实验极为重要,建议使用精密加样器准确加样.并经常对精密加样器进行校准. 7.3 每板建议设阴、阳性对照血清各两孔,设空白对照时,不加样品及酶标记抗体,其余各步相同. 7.4 洗涤时各孔均需加满,防止孔内有游离酶未能洗净. 7.5 加试剂前应将试剂瓶翻转数次,使液体混匀. 7.6 实验环境应保持一定湿度,避风.避免在过高温度下进行实验. 7.7 样品显色深浅与样品中抗体的含量没有一定正相关.任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗体存在. 7.8 试剂各组分在正当处理和保存的情况下直至校期都保持稳定,不能使用过校期的试剂盒.不同品名、不同批号的试剂不可混用,以免产生错误结果. 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第22页共99页 (二)乙型肝炎病毒（HBV） 1、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） 1 .检验目的：检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg），其阳性者为急性乙型肝炎潜伏期或急性、慢性乙肝患者，无症状HBsAg携带者。 2. 检验原理：在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HBsAb—HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg） 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。 3.1 HBsAg微孔板（96人份） 3.2 HBsAg酶标记抗体 3.3 HBsAg阳性对照血清 3.4 HBsAg阴性对照血清 3.5 浓缩洗涤液 25ml 3.6 底物 A 3.7 底物 B 3.8 终止液（2M H2SO4） 3.9 封口膜 3.10 自封袋 4. 试剂的贮存： 直接使用，2~8℃贮存至失效期避免阳光直射。 5.操作： 5.1 平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃—25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 5.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。 5.4 加样：每孔中加入稀释液20 uL，病人血清100 uL，设阴、阳性对照各1孔，每孔加入100 uL，空白对照1孔。 5.5 温育：置37℃温育60分钟，室温平衡5分钟。 5.6 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30—60秒的浸泡时间）。 5.7 加酶：每孔加入酶50 uL，温浴30min 洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干 5.8 显色：每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 5.9 终止：每孔加终止液50uL，混匀。 5.10 测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白对照一孔，30分钟内完成测定，并记录结果）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第23页共99页 6. 结果判定 6.1 临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD均值N×2.1 阴性对照OD均值大于0.1或阳性对照小于0.4时应重新试验，小于0.05时以0.05计算 6.2 结果判定：样品OD值S/C.O.≥1者为HBsAg阳性 样品OD 值S/C.O.＜1者为HBsAg阴性 7.标本： 7.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。 7.2 溶血标本不能用于检测。 7.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 7.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 8.注意事项 8.1 每板建议设阴、阳性对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。 8.2 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。 8.3 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去1—2滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 8.4 所有样品都应按传染源处理。 8.5 样品显色深浅与样品中抗原的含量没有一定正相关。任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗原存在。 8.6 封口膜使用说明：（1）微孔板拆封后，在取出当天所需的微孔条后，其余微孔条可以封口膜封存以避免受潮。在封存时，注意勿把封口膜粘贴到微孔条低部，以免影响其透光性。 （2）微孔板温育时，以封口膜覆盖孔口，可避免其它因素对实验带来的非预期的影响。 8.7 不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第24页共99页 2、乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb） 1 .检验目的：检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗体（HBsAb），其为保护性抗体，大多数急性病人恢复期后为阳性，接种乙肝疫苗后产生免疫力。 2. 检验原理：在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗原（HBsAg），配以酶标记抗体（HBsAg—HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗体（HBsAb） 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。 3.1 HBsAb微孔板（96人份） 3.2 HBsAb酶标记抗原 3.3 HBsAb阳性对照血清 3.4 HBsAb阴性对照血清 3.5 浓缩洗涤液 25ml 3.6 底物 A 3.7 底物 B 3.8 终止液（2M H2SO4） 3.9 封口膜 3.10 自封袋 4. 试剂的贮存： 直接使用，2~8℃贮存至失效期，避免阳光直射。 5.操作： 5.1 平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃—25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 5.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。 5.4 加样：用加样器加入待测血清50uL，设阴、阳性对照各1孔，每孔加入50 uL，空白对照1孔。 5.5 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗原50uL；轻拍混匀。 5.6 温育：置37℃温育30分钟，室温平衡5分钟。 5.7 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30—60秒的浸泡时间）。 5.8 显色：每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 5.9 终止：每孔加终止液50uL，混匀。 5.10 测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白对照一孔，30分钟内完成测定，并记录结果）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第25页共99页 6.结果判定 6.1 临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD均值N×2.1 阴性对照OD均值大于0.1或阳性对照小于0.4时应重新试验，小于0.05时以0.05计算 6.2 结果判定：样品OD值S/C.O.≥1者为HBsAb阳性 样品OD 值S/C.O.＜1者为HBsAb阴性 7.标本： 7.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。。 7.2 溶血标本不能用于检测。 7.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 7.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 8.注意事项 8.1 每板建议设阴、阳性对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。 8.2 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净加，滴加前应弃去1—2滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 8.3 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去1—2滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 8.4 所有样品都应按传染源处理。 8.5 样品显色深浅与样品中抗原的含量没有一定正相关。任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗原存在。 8.6 封口膜使用说明：（1）微孔板拆封后，在取出当天所需的微孔条后，其余微孔条可以封口膜封存以避免受潮。在封存时，注意勿把封口膜粘贴到微孔条低部，以免影响其透光性。 （2）微孔板温育时，以封口膜覆盖孔口，可避免其它因素对实验带来的非预期的影响。 8.7 不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第26页共99页 3.乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg） 1. 检验目的：检测人血清（或血浆）中乙肝e抗原（HBeAg），其阳性提示病毒复制，传染性强。 2. 检验原理：在微孔条上预包被纯化乙肝e抗体（HBeAb），配以酶标记抗体（HBeAb—HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝e抗原（HBeAg） 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。 3.1 HBeAg微孔板（96人份） 3.2 HBeAg酶标记抗体 3.3 HBeAg阳性对照血清 3.4 HBeAg阴性对照血清 3.5 浓缩洗涤液 25ml 3.6 底物 A 3.7 底物 B 3.8 终止液（2M H2SO4） 3.9 封口膜 3.10 自封袋 4. 试剂的贮存： 直接使用，2~8℃贮存至失效期避免阳光直射。 5. 操作： 5.1 平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃—25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 5.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。 5.4 加样：用加样器加入待测血清50uL，设阴、阳性对照各1孔，每孔加入50 uL，空白对照1孔。 5.5 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50uL；轻拍混匀。 5.6 温育：置37℃温育30分钟，室温平衡5分钟。 5.7 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30—60秒的浸泡时间）。 5.8 显色：每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 5.9 终止：每孔加终止液50uL，混匀。 5.10 测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白对照一孔，30分钟内完成测定，并记录结果）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第27页共99页 6. 结果判定 6.1 临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD均值N×2.1 阴性对照OD均值大于0.1或阳性对照小于0.4时应重新试验，小于0.05时以0.05计算 6.2 结果判定：样品OD值S/C.O.≥1者为HBeAg阳性 样品OD 值S/C.O.＜1者为HBeAg阴性 7. 标本： 7.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。 7.2 溶血标本不能用于检测。 7.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 7.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 8. 注意事项 8.1 每板建议设阴、阳性对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。 8.2 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。 8.3 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去1—2滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 8.4 所有样品都应按传染源处理。 8.5 样品显色深浅与样品中抗原的含量没有一定正相关。任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗原存在。 8.6 封口膜使用说明：（1）微孔板拆封后，在取出当天所需的微孔条后，其余微孔条可以封口膜封存以避免受潮。在封存时，注意勿把封口膜粘贴到微孔条低部，以免影响其透光性。 （2）微孔板温育时，以封口膜覆盖孔口，可避免其它因素对实验带来的非预期的影响。 8.7 不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第28页共99页 4.乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb） 1 .检验目的：检测人血清（或血浆）中乙肝e抗体（HBeAb），其为恢复期和有些慢性病例及携带者暂时阳性，不是保护性抗体，反映传染性低。 2. 检验原理：在微孔条上预包被纯化乙肝e抗体（HBeAb），配以酶标记抗体（HBeAb—HRP）、中和抗原（HBeAg）及TMB等其它试剂，采用竞争法原理检测人血清（或血浆）中乙肝e抗体（HBeAb） 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。 3.1 HBeAb微孔板（96人份） 3.2 HBeAb酶标记抗体 3.3 HBeAb阳性对照血清 3.4 HBeAb阴性对照血清 3.5 HBeAb中和抗原 3.6 浓缩洗涤液 25ml 3.7 底物 A 3.8 底物 B 3.9 终止液（2M H2SO4） 3.10 封口膜 3.11 自封袋 4. 试剂的贮存： 直接使用，2~8℃贮存至失效期，避免阳光直射。 5. 操作： 5.1 平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃—25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 5.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。 5.4 加样：用加样器加入待测血清50uL，设阴、阳性对照各1孔，每孔加入50 uL，空白对照1孔。 5.5 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50uL；轻拍混匀。 5.6 中和：分别在每孔中加入中和抗原（HBeAg）50ul，轻拍混匀。 5.7 温育：置37℃温育30分钟，室温平衡5分钟。 5.8 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30—60秒的浸泡时间）。 5.9 显色：每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 5.10终止：每孔加终止液50uL，混匀。 5.11 测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白对照一孔，30分钟内完成测定，并记录结果）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第29页共99页 6. 结果判定 6.1 临界值（C.O.）的计算： 待测样品为原倍血清时，临界值（C.O.）=阴性对照孔OD均值N×0.2 待测样品为非原倍血清时，临界值（C.O.）= 阴性对照孔OD均值N×0.5 （稀释倍数<2.5的血清为原倍血清，稀释倍数≥2.5的血清为非原倍血清） 6.2 结果判定：样品OD值S/C.O.≤ 1者为HBeAb阳性 样品OD 值S/C.O.＞1者为HBeAb阴性 7. 标本： 7.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。 7.2 溶血标本不能用于检测。 7.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 7.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 8. 注意事项 8.1 每板建议设阴、阳性对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。 8.2 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。 8.3 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去1—2滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 8.4 所有样品都应按传染源处理。 8.5 样品显色深浅与样品中抗体的含量没有一定正相关。任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗体存在。 8.6 封口膜使用说明：（1）微孔板拆封后，在取出当天所需的微孔条后，其余微孔条可以封口膜封存以避免受潮。在封存时，注意勿把封口膜粘贴到微孔条底部，以免影响其透光性。 （2）微孔板温育时，以封口膜覆盖孔口，可避免其它因素对实验带来的非预期的影响。 8.7 不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第30页共99页 5.乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb） 1 .检验目的：检测人血清（或血浆）中乙肝核心抗体（HBcAb），所有急性和慢性病例及携带者阳性，因此是HBV感染的标记物。 2. 检验原理：在微孔条上预包被纯化乙肝核心抗原（HBcAg），配以酶标记特异抗体（HBcAb—HRP）及TMB等其它试剂，采用竞争抑制法原理检测人血清（或血浆）中乙肝核心抗体（HBcAb） 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。 3.1 HBcAb微孔板（96人份） 3.2 HBcAb酶标记抗体 3.3 HBcAb阳性对照血清 3.4 HBcAb阴性对照血清 3.5 浓缩洗涤液 25ml 3.6 底物 A 3.7 底物 B 3.8 终止液（2M H2SO4） 3.9 封口膜 3.10 自封袋 4. 试剂的贮存： 直接使用，2~8℃贮存至失效期，避免阳光直射。 5. 操作： 5.1 平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃—25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 5.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。 ★ 作为临床诊断依据，必须将原倍血清样品按照1：30稀释后再检验，稀释液应采用生理盐水或10Mmpbs；作为流行病学调查依据，使用原倍血清检验。 5.4 加样：用加样器加入待测血清50uL，设阴、阳性对照各1孔，每孔加入50 uL，空白对照1孔。 5.5 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50uL；轻拍混匀。 5.6 温育：置37℃温育30分钟，室温平衡5分钟。 5.7 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30—60秒的浸泡时间）。 5.8 显色：每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 5.9终止：每孔加终止液50uL，混匀。 5.10 测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白对照一孔，30分钟内完成测定，并记录结果）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第31页共99页 6. 结果判定 6.1 临界值（C.O.）的计算： 待测样品为原倍血清时，临界值（C.O.）=阴性对照孔OD均值N×0.2 待测样品为非原倍血清时，临界值（C.O.）= 阴性对照孔OD均值N×0.5 （非原倍血清是指稀释血清、质控血清等） 6.2 结果判定：样品OD值S/C.O.≤ 1者为HBcAb阳性 样品OD 值S/C.O.＞1者为HBcAb阴性 7. 标本： 7.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。 7.2 溶血标本不能用于检测。 7.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 7.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 8. 注意事项 8.1 每板建议设阴、阳性对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。 8.2 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。 8.3 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去1—2滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 8.4 所有样品都应按传染源处理。 8.5 样品显色深浅与样品中抗体的含量没有一定正相关。任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗体存在。 8.6 封口膜使用说明：（1）微孔板拆封后，在取出当天所需的微孔条后，其余微孔条可以封口膜封存以避免受潮。在封存时，注意勿把封口膜粘贴到微孔条底部，以免影响其透光性。 （2）微孔板温育时，以封口膜覆盖孔口，可避免其它因素对实验带来的非预期的影响。 8.7 不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第32页共99页 6.乙型肝炎病毒核心IgM抗体（HBc-IgM） 1 .检验目的：检测稀释血清（或血浆）中的乙肝核心IgM抗体（HBc-IgM），抗HBc-IgM阳性可以反映活动的病毒复制，不是保护性抗体。 2. 检验原理：在微孔条上预包被抗人-IgM（u链），配以乙肝核心抗原（HBcAg）和酶标记特异抗体（HBcAb—HRP）及TMB等其它试剂，采用捕获法原理，检测稀释血清（或血浆）中的乙肝核心IgM抗体（HBc-IgM）。 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。 组成成份 1.HBc-IgM酶标板 2.HBc-IgM阳性对照 3.HBc-IgM阴性对照 4.HBc-IgM酶标试剂 5.HBc-IgM核心抗原 6.浓缩洗涤液 7.显色剂A液 8.显色剂B液 9.终止液 10.自封袋 11.封板膜 12.说明书 96T 8×12孔或12×8孔 1ml×1管 1ml×1管 7.0ml×1瓶 7.0ml×1瓶 25ml×2瓶 7.0ml×1瓶 7.0ml×1瓶 7.0ml×1瓶 1个 2张 1份 4. 试剂的贮存： 2~8℃下保存，有效期为12个月。 5. 操作： 5.1配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水按1：19倍稀释。 5.2编号：将样品对应微孔板按序编号。 5.3加样：待测样本用生理盐水作1：1000稀释，每孔加入稀释样本100 uL。设阴阳对照各1孔，每孔加入100 uL，并设空白对照1孔。 5.4温育：置37℃20分钟。。 5.5洗板：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30—60秒的浸泡时间） 5.6加抗原、酶：每孔中加入抗原、酶各50 uL，轻拍混匀。 5.7温育： 置37℃40分钟。 5.8洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30—60秒的浸泡时间）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第33页共99页 5.9显色：每孔加入A.B各50 uL轻拍混匀，37℃暗置15分钟。 5.10测定：每孔加终止液50ul，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。设定酶标仪波长于450nm处(建议用双波长450nm/630nm检测)，用空白孔调零后测定各孔A值。 6. 结果判定 6.1临界值(CUTOFF)计算：临界值=阴性对照孔A均值NC×2.1 阴性对照OD均值大于0.1或阳性对照小于0.4时应重新试验，小于0.05时以0.05计算。 6.2结果判定：样品OD值S/C.O. <1者为HBc-IgM阴性。 样品OD 值S/C.O.≥1者为HBc-IgM阳性。 7. 标本： 7.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。 7.2 使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。 7.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 7.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 8. 注意事项 8.1 每板建议设阴、阳性对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。 8.2 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。 8.3 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去1—2滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 8.4 所有样品都应按传染源处理。 8.5 样品显色深浅与样品中抗体的含量没有一定正相关。任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗体存在。 8.6 封口膜使用说明：（1）微孔板拆封后，在取出当天所需的微孔条后，其余微孔条可以封口膜封存以避免受潮。在封存时，注意勿把封口膜粘贴到微孔条底部，以免影响其透光性。 （2）微孔板温育时，以封口膜覆盖孔口，可避免其它因素对实验带来的非预期的影响。 8.7 不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第34页共99页 （三）丙型肝炎病毒抗体（HCV） 1. 检验目的：检测人血清（或血浆）样品中的丙肝病毒抗体. 2. 检验原理：在微孔条上预包被高纯度基因重组HCV结构区抗原,可与样品中抗HCV抗体反应,再加入HRP标记的兔抗人IgG抗体与之结合,然后用TMB底物作用显色,通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判断样品中HCV抗体的存在与否. 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。。 3.1 HCV酶标板 （96人份） 3.2 HCV阳性对照 1管 3.3 HCV阴性对照 1管 3.4 HCV酶标试剂 1瓶 3.5 HCV样品稀释液 1瓶 3.6 HCV浓缩洗涤液 1瓶 3.7 显色剂 A 1瓶 3.8 显色剂 B 1瓶 3.9 终止液（2M H2SO4）1瓶 3.10 封口膜 3张 3.11 自封袋 3.12 说明书 1份 4. 试剂的贮存： 直接使用，2~8℃贮存至失效期避免阳光直射。 5. 操作： 5.1 平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃—25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 5.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号,每板应设阴性对照1孔,阳性对照1孔,空白对照1孔(空白孔不加样品及酶标试剂,其余各步相同). 5.4 稀释: 用加液器每孔加入100uL样品稀释液. 5.5加样：分别用加样器在相应孔中加入阴性或阳性对照血清10uL待测血清样品10uL。 5.6 温育：置37℃温育60分钟， 5.7 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干。 5.8 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体100uL；轻拍混匀。 5.9 温育：置37℃温育30分钟。 5.10 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干。 5.11 显色：每孔加显色剂A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置30分钟。 5.11 终止：每孔加入终止液50uL轻轻振荡混匀 5.12测定：用酶标仪单波长450nm或双波长630nm测定各孔OD值(建议用双波长测定，用单波长测定时需用空白对照孔调零)并记录结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第35页共99页 6. 结果判定 .6.1临界值(CUTOFF)计算：临界值=阴性对照孔A均值NC×2.8 阴性对照OD均值大于0.08或阳性对照小于等于0.5时应重新试验，小于0.05时以0.05计算。 6.2结果判定：样品OD值S/C.O. <1者为HCV阴性。 样品OD 值S/C.O.≥1者为HCV阳性。 7. 标本： 7.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。 7.2 溶血标本不能用于检测。 7.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 7.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 8. 注意事项 8.1 试剂盒从冷藏环境中取出时应置室温平衡 15-30分钟后方可使用,未用完的微孔条用自封袋密封2-8℃保存,温育酶标板的时间和温度必须严格控制. 8.2 加试剂前，应先将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。加液时使用移液器加,并经常校对移液器的准确性.，避免加样时在孔中产生气泡。 8.3 洗涤时各孔均需加满洗液,防止孔口内有游离酶不能洗净.使用洗板机洗涤应设定30-60秒浸泡时间. 8.4 HCV抗体检测结果的判定必须以酶标仪读书为准,使用双波长450/630nm检测时,可不设空白对照. 8.5 所有样品和废弃物都应按传染源处理,终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全. 8.6 操作应按说明书严格进行,有效期内使用,封板膜为一次性用品不能重复使用. 8.7 操作过程中禁止酶标板及其它试剂、次氯酸类消毒剂接触。 8.8洗板机在使用结束后要使用新鲜蒸馏水或高品质去离子水冲洗干净，以防止管路阻塞和腐蚀。 8.9终止后请尽早用酶标仪进行读数测量。样本的检测读值与样本中抗体的浓度不一定呈正相关关系。 8.10不同厂商、不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第36页共99页 （四）梅毒螺旋体抗体（AntT—TP） 1. 检验目的：用于检测血清或血浆标本中的梅毒螺旋体。 2. 检测原理：本试剂为又对抗原夹心ELTSA方法，时机盒中所用色被抗原和酶标记抗原
基因工程表达的煤毒螺旋体特异性抗原，显色剂为TMB。 3. 试剂：英科新创（厦门）科技有限公司。 3.1 TP酶标板 （96人份） 3.7显色液B 1瓶 3.2 TP阳性对照 1管 3.8 终止液 1瓶 3.3阴性对照 1管 3.9自封袋 1个 3.4TP酶试剂 1管 3.10 封板膜 3张 3.5浓缩洗涤液 1瓶 3.11说明书 1份 3.6显色液A 1瓶 4. 操作： 4.1配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 4.2编号：将酶标板条固定于板架上，设阳性对照1孔,阴性对照1孔，空白对照1孔(空白孔不加样品及每试剂,其余各步相同)。 4.3加样：分别在相应孔中加入待测样品100ul,阴、阳性对照各加入100ul震荡混匀。 4.4温育：置37℃温育60分钟。 4.5 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干。 4.6 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体100uL；轻拍混匀。 4.7 温育：置37℃温育30分钟。 4.8 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干。 4.9 显色：每孔加显色剂A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置30分钟。 4.10 终止：每孔加入终止液50uL轻轻振荡混匀 4.11测定：用酶标仪单波长450nm或双波长630nm测定各孔OD值(建议用双波长测定，用单波长测定时需用空白对照孔调零)并记录结果。 5.结果判定 .5.1临界值(CUTOFF)计算：临界值=阴性对照孔A均值NC×2.8 阴性对照OD均值大于0.08或阳性对照小于等于0.5时应重新试验，小于0.05时以0.05计算。 5.2结果判定：样品OD值S/C.O. <1者为TP阴性。 样品OD 值S/C.O.≥1者为TP阳性。： 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第37页共99页 6. 标本： 6.1静脉抽取空腹患者标本3.0mL（真空采血管），将血液放置在37℃水浴中30分钟后，分离血清。 6.2 溶血标本不能用于检测。 6.3 用完的标本，应在样品管上注明日期，放置在2—8℃冰箱中保存一周。 6.4 样品放置一周后，逐管加入1：50的84消毒液，并放置4小时后，装入医疗垃圾袋由医院专人按医疗垃圾处理。 7. 注意事项 7.1 试剂盒从冷藏环境中取出时应置室温平衡 15-30分钟后方可使用,未用完的微孔条用自封袋密封2-8℃保存,温育酶标板的时间和温度必须严格控制. 7.2 加试剂前，应先将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。加液时使用移液器加,并经常校对移液器的准确性.，避免加样时在孔中产生气泡。 7.3 洗涤时各孔均需加满洗液,防止孔口内有游离酶不能洗净.使用洗板机洗涤应设定30-60秒浸泡时间. 7.4 HCV抗体检测结果的判定必须以酶标仪读书为准,使用双波长450/630nm检测时,可不设空白对照. 7.5 所有样品和废弃物都应按传染源处理,终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全. 7.6 操作应按说明书严格进行,有效期内使用,封板膜为一次性用品不能重复使用. 7.7 操作过程中禁止酶标板及其它试剂、次氯酸类消毒剂接触。 7.8洗板机在使用结束后要使用新鲜蒸馏水或高品质去离子水冲洗干净，以防止管路阻塞和腐蚀。 7.9终止后请尽早用酶标仪进行读数测量。样本的检测读值与样本中抗体的浓度不一定呈正相关关系。 7.10不同厂商、不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第38页共99页 （五）肺炎支原体（IgM、IgG） 1.预期用途：肺炎支原体肺炎是由支原体感染引起的呼吸道和肺部的急性炎症改变。该试剂盒采用金标免疫渗滤分析原理定性测定人血清中的肺炎支原体（IgM、IgG）抗体。 2.检验原理： 2.1肺炎支原体IgM：本试剂盒应用纯化肺炎支原体特异性抗原和单克隆抗体，结合金标免疫渗滤实验原理，以间接法检测血清中的MP- IgM抗体。 2.2肺炎支原体IgG：本试剂盒依据间接法免疫测定原理，以胶体金粒子作为标记示踪物，结合金标免疫渗滤试验原理，测定血清标本中的肺炎支原体抗体。先将特异性MP抗原固相化于硝酸纤维素膜上，当血清标本根据渗滤作用通过硝酸纤维素膜时，其中的MP抗体便与膜上的固相抗原发生特异性结合形成复合物，而其他无关物质则被滤过，再加上金标记抗人IgG单克隆抗体，滤过时便与复合物结合，形成肉眼即可方便观察的红色印迹。 3.试剂：潍坊市康华生物技术有限公司。 3.1检测板 20块 3.3洗涤液 1X5.0ml 3.2金标液 1X3.5ml 3.4说明书 1份 4.储存条件及有效期： 4.1.试剂盒置2-8℃冷藏，有效期为10个月。 4.2试剂盒可短期常温运输。寒冬或炎夏季节应采用相应防护措施，避免冻融或长期高温。 5.样本要求 5.1必需使用新鲜血清或2-8℃放置3天内的血清测定。 5.2特殊情况下标本无法及时检测，应于-20℃以下保存。任何标本在临用前均须充分离心后取澄清液体部分检测。 6检验方法： 6.1肺炎支原体IgM：1）、取出试剂盒，室温平衡20-30分钟； 2）、滴加洗涤液2滴于反应孔中，待液体将膜完全湿润； 3）、加待测血清50 ul（若用样品吸管则加2滴）于反应孔中，待液体充分吸入； 4）滴加洗涤液2滴于反应孔中，待液体充分吸入； 5）滴加金标液3滴于反应孔中，待液体充分吸入； 6）滴加洗涤液3滴于反应孔中，待液体充分吸入后于3分钟内观察结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第39页共99页 6.2肺炎支原体IgG：1）、取出试剂盒，室温平衡20-30分钟； 2）、滴加洗涤液1滴于反应孔中，待液体将膜完全湿润 3）、加待测血清150 ul（若用样品吸管则加2滴）于反应孔中，待液4）、5）滴加金标液3滴于反应孔中，待液体充分吸入； 6）滴加洗涤液3滴于反应孔中，待液体充分吸入后于3分钟内观察 体充分吸入； 结果。 7.检验结果的解释： 7.1阴性-质控点C显示红色，检测点T位置无红点出现； 7.2阳性-质控点C显示红色，检测点T位置有红点出现； 7.3无效-质控点C不显色即表明操作失误或试剂失效。 8检验方法的局限性：. 8.1本试剂盒与所有定性检测试剂一样，只用于筛选试验。 8.2感染时间短或处于窗口期的标本，由于其抗体还不存在或太低，用本试剂盒检测会出现阴性结果。 8.3个别免疫受抑制抗体或免疫亢进个体其检测结果会有差异。 8.4本试剂盒不能确定（MP-IgM、MP-IgG）抗体的确切含量。 8.5本试剂为定性检测试剂，任何检测结果均需要与临床信息联系来综合判定。 9.注意事项： 9.1必须使用新鲜血清或2-8℃放置3天内的血清测定。少数标本（高脂血、高胆红素、溶血）背景轻微偏深，一般不影响结果判定。 9.2加有抗凝剂、促凝剂的标本渗滤速度缓慢，底色太红，影响结果判读，建议不使用。 9.3加液体的各步操作之间不得有时间间隔；同一步骤中所加液体应迅速一次加入后等其渗入。 9.4超过规定时间出现的结果无效。 9.5质控点的强弱并不代表试剂质量的优劣，只要其显色清楚可见，即表明试剂有效。 9.6不同产品、同产品不同批次之间的金标液、洗涤液严禁混用。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第40页共99页 （六）.风湿三项（CRP、ASO、RF） 1.预期用途：本试供医疗机构用于体外对人血清中（ CRP、ASO、RF）定性或半定量测定，做辅助诊断用。 2.检验原理： 2.1 CRP：本试剂胶乳液是由C-反应蛋白多抗包被胶乳并且校正测灵敏度至CRP含量＜6mg/L,超过上述含量即出现肉眼可见凝集颗粒，使用本试剂血清标本不需要稀释即可直接测定。 2.2 ASO：本试剂胶乳液是由溶血素“O”包被胶乳，并且校正测定灵敏度至ASO含量＜200IU/mL,超过上述含量即出现肉眼可见凝集颗粒，使用本试剂血清标本不需要稀释即可直接测定。 2.3RF：本试剂胶乳液是由纯化的人IgG包被胶乳，并且校正测定灵敏度至RF含量＜20IU/mL,超过上述含量即出现肉眼可见凝集颗粒，使用本试剂血清标本不需要稀释即可直接测定。 3试剂：上海捷门生物技术合作公司 3.1胶乳液 1瓶 3.2阴性对照 1瓶 3.3阳性对照 1瓶 不同批号试剂盒中的胶乳液、阴性对照和阳性对照不能使用。 4.储存条件及有效期：储藏温度2-10℃，切勿冷冻，有效期为一年。 5.样本要求：经离心获得新鲜血清样本，贮存于2-8℃，48小时内使用，时间过长须冰冻贮存。 6.检验方法： 6.1定性试验：试剂使用前，预置达室温；轻轻混匀胶乳试剂；核对阴性和阳性对照；在反应孔中加一滴未稀释血清50 ul（RF是20 ul）；然后加一滴胶乳试剂在血清中；搅匀、轻轻摇动使其充分混合，三分钟后观察结果。阴性和阳性对照同上法操作。 6.2半定量试验：血清于生理盐水（0.9﹪氯化钠溶解于蒸馏水中，稀释至100ml）倍比稀释，参照下法操作： 1）CRP 稀释倍 1：2 1:4 1:8 血清 100 ul 生理盐水 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 标本量 50 ul 50 ul 50 ul mg/L ＞12 ＞24 ＞48 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第41页共99页 2）ASO 稀释倍 1：2 1:4 1:8 血清 100 ul 生理盐水 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 标本量 50 ul 50 ul 50 ul mg/L ＞400 ＞800 ＞1600 3）RF 稀释倍 1：2 1:4 1:8 1:16 血清 100 ul 生理盐水 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 标本量 20 ul 20 ul 20 ul 20 ul mg/L ＞40 ＞80 ＞160 ＞320 7.参考范围： 7.1CRP: ＜6mg/L 7.2ASO:0-200IU/ml 7.3成人＜200IU/ml 8.检验结果的解释： 8.1CRP:凝集出现可判断样本中CRP＞6mg/L阳性；无凝集出现可判断样本中CRP＜6mg/L阴性； 8.2ASO: 凝集出现可判断样本中ASO＞200IU/ml阳性；无凝集出现可判断样本中ASO ＜200IU/ml阴性； 8.3RF:凝集出现可判断样本中RF＞20IU/ml阳性；无凝集出现可判断样本中RF ＜20IU/ml阴性； 9.检验方法的局限性： 本试剂适用于定性、半定量检测人体中（CRP、ASO、RF）的含量，如需定量检测可使用（CRP、ASO、RF）定量上机试剂。 10.注意事项： 10.1加试剂和阴性、阳性对照，保证液滴大小一致。 10.2若阴阳性对照结果出现异常，则试剂不可使用。 10.3试剂盒贮存于2-10℃，受热会导致试剂阳性率偏高，切勿冷冻。 10.4阴阳性对照经检测HBSAg、HCV、HIV为阴性，但仍须如病人样品一样小心处理。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第42页共99页 免疫室内质控失控分析管理制度 室内质控出现失控时，应填写失控报告单，并上交专业主管，由专业主管做出是否发出与测定质控品相关的那批患者标本检验报告并分析及登记失控原因。 失控信号的出现受多种因素的影响，这些因素包括操作上的失误、试剂、校准物、质控品的失效，仪器维护不良以及采用的质控规则、质控限范围、一次测定的质控标本数等等。失控信号一旦出现就意味着与测定质控品相关的那批患者标本报告可能作废。 此时，首先要尽量查明导致的原因，然后再随机挑选出一定比例(例如5-10％)的患者标本进行重新测定，最后根据既定标准判断先前测定结果是否可接受，对失控做出恰当的判断。对判断为真失控的情况，应该在重做质控结果在控以后，对相应的所有失控患者标本进行重新测定。如失控信号被判断为假失控时，常规测定报告可以按原先测定结果发出，不必重做。当得到失控信号时，可以采用如下步骤去寻找原因： 一、立即重测定同一质控品。此步是主要是用以查明人为误差，每一步都认真仔细操作，以查明质控的原因；另外，这一步还可以查出偶然误差，如是偶然误差，则重测的结果应控。如果重测结果仍不在允许范围，则可以进行下一步操作。 二、新开一瓶质控品，重测失控项目。如果质控品结果正常，那么原来那瓶质控血清可能过期或在室温放置时间过长而变质或者被污染。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第43页共99页 三、进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否需要更换，比色杯是否需要清洗或更换，对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂以查明原因。如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。 四、重新校准，重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 五、请实际工作经验丰富的工作人员或专家的帮助。 如果前五步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试剂的原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求技术支援。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第44页共99页 外部质控血清的制备和保存 1、质控血清的制备和保存（以ELISA试验检测HAV、HBV、HCV、TP抗体为例） 在每次实验中必须包含有内部对照质控血清和外部对照质控血清。 （1）、内部对照质控血清指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质量控制的基础。每一次检测必须使用内部对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。 （2）、外部对照质控血清是为了监控检测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异而由实验室设置的一套对照血清，包括强阳性、弱阳性和阴性对照血清。也可以只设置一个弱阳性对照，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。 2、外部对照质控血清的保存 （1）、按一周实验用量分装、分类、标记、封口、-20℃冻存于非自动除霜冰箱中。 （2）、外部对照血清不可反复冻融，一旦融化后应该存放28℃，供一周内使用。 3、外部对照质控血清的使用 每一次实验必须使用外部对照质控血清，以便监控实验的重复性和稳定性。同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异，绘制质量控制图。 4、外部对照质控物的质量要求 质控物的管间变异必须小于监测系统预期的变异（CV＜20%＝，并且质控物的成分应在稳定状态中。质控物应无菌，并不含有影响ELISA反应的防腐剂。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第45页共99页 仪器的使用维护 （一）、设立常用仪器的维护及校准制度，以保证正常运转。 1、 酶标读数仪、洗板机 每天：核对滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。 每周：清洁仪器表面，保护光学零件不沾灰尘。 每月：检查洗涤时各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。 每年：检查、清洗滤光片，如果出现破裂或霉点则要更换。根据仪器内具有的校准程序或使用校准板，对滤光片的精密度进行校准并保留记录。 实验过程中发现异常情况，应随时进行处理，可根据使用情况更换必要的部件。 2、移液器 1年至少应该标定1次，发现异常情况应随时进行校准。 标定方法包括有色溶液光谱分析法、称量校准法、同位素计数法以及使用配套校准盒等。校准多道移液器时，必须保证每一个加样头都能够连续、准确地加样。移液器的精密度应在厂家说明书规定的范围内。 （二）、仪器使用环境 良好的工作环境不仅能确保免疫实验室的酶标仪、洗板机等仪器的准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。 1、仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。 2、仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第46页共99页 3、为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。 4、操作环境温度应在15°C-40°C之间，环境湿度在15%-85%之间。 5、操作时电压应保持稳定。 6、操作环境空气清洁，避免水汽、烟尘。 7、保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。 （三）、仪器操作注意事项 1、使用移液器加液，移液枪头不能混用 2、洗板要干净，避免交叉污染。 3、严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。 4、请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成注意做好清洁工作。 5、不要在测量过程中关闭电源。 6、对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。 7、使用后盖好防尘罩。出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪、洗板机等仪器 制定人 修改人 审核人 批准人 期准日期 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第47页共99页 冰箱的使用、操作和维护程序 1 目的：正确操作使用仪器设备，确保检测质量，保障仪器设备的使用寿命，充分发挥仪器效益和效率。 2 范围：冰箱 3 使用程序 3.1 仪器设备的使用授权： a）仅有本实验室工作人员有权使用实验室的仪器设备。 b）仪器设备的使用者在使用前首先必须熟悉仪器设备的操作使用程序并经室主任考核认可。 3.2 仪器的使用： a）仪器设备的使用严格遵守分区使用管理。 b）仪器设备的使用必须严格遵循仪器设备的标准操作规程。 c）主要仪器使用时每次工作应有相应的使用记录。 4 操作及维护程序 4.3.1 开、关机：试剂冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，冷藏室温度 开关置于4℃，冷冻室温度开关置于 -20℃，2小时后用温度计确认。系统进入正常运行状态后即可正常使用。 制定人 修改人 审核人 批准人 期准日期 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第48页共99页 4.3.2 若冰箱较长时间不用或需要送修时需按以下步骤操作： a）关闭冰箱电源，并拔下电源插头。 b）清空冰箱内的所有贮存物，并妥善放置到其它冰箱内。打开冰箱门，等待冰箱内的霜化完。 c）用肥皂水擦洗干净冰箱内胆，后用消毒液擦洗一次。 d）保持冰箱门打开待其自然干燥。 4.3.3 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。 4.3.4 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。 4.3.5 放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。 4.3.6 保持冰箱出水口通畅；非自动除霜冰箱应定期除霜；定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。 4.3.7 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，一年装订成册存档。 4.3.8 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。 4.3.9 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。 制定人 修改人 审核人 批准人 期准日期 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第49页共99页 桂林优利特URIT-660酶标分析仪操作维护规程 （一）仪器信息： 1.1 产品组成及分类： a) 本仪器由电路、光学系统、显示屏以及外置打印机（选购）组成。 b) 仪器全称为URIT-660酶标分析仪（以下简称为仪器），是一种主要应用于各种实验室，包括临床免疫实验室的仪器。按医疗器械产品管理分类属于第二类免疫学分析仪器。 1.2 产品适用范围： 供临床酶标免疫测试分析用。 （二）工作原理： 酶标仪利用分光光度计的原理，读取酶免实验中反应物的吸光度值，从而进行抗原或抗体含量的分析。 （三）仪器安装： 3.1 安装要求： a) 首次装机必须经优利特公司授权的有相应资格的工程师来完成。 b) 仪器必须安置在水平、稳固的工作台上，避免阳光直接照射，避开过冷、过热的排风口，远离干燥机、离心机、X-射线设备、复印机和超声清洗机。 c) 为了保持良好的通风效果，酶标分析仪的周围必须保留一定的空间；仪器与周围物体至少保留40cm的距离以利通风；仪器周围应有足够的空间进行保养、维修。 d) 尘粒会对仪器的检测结果以及性能有较大影响，医院在使用仪器前应解决环境的除尘问题。 e) 仪器通电状态下，严禁对仪器的任何电器连接件进行拔插。为了预防电力干扰及用户人身安全，使用前请确认仪器的三芯电源线插入三相电源输出插座。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第50页共99页 f) 仪器工作的电压、环境要求： 环境温度：0℃~40℃；相对湿度：≤80% （无冷凝）； 大气压力：86kPa~106kPa； 使用电源：AC 220V±22V ，50Hz/60Hz； 本设备的使用环境必须符合本说明书中的环境规格要求，还应当合理的避免存在噪声、震动、尘土、腐蚀性或易燃、易爆物质等。 警告：任何未经授权或不具备该仪器维修资格的人员，在任何时候均不得将仪器外壳上的螺钉打开，否则发生的一切问题将由用户承担！ 3.2 安装顺序和方法： a) 小心地从包装箱中取出仪器和附件，保存好包装材料以备以后运输或保存之用。 b） 请按照装箱单清点附件。 c） 检查仪器是否有进液或水浸。 d） 检查仪器是否有任何机械性损坏。 e） 检查全部外露导线、插入部分和附件。 如有问题请立即与本公司用户服务部或代理商联系。 3.3记录仪纸安装 a) 按记录仪纸仓开关键（OPEN），然后用手打开记录仪纸仓翻盖。 b) 将热敏打印纸放入纸仓（打印纸需热敏面朝下，如放反则打印不出字符），然后将纸仓翻盖合上。 c) 记录仪自检方法：按住SEL键不放，上电，然后松开SEL键，记录仪将打出自检样条。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第51页共99页 （四）仪器标准操作程序： 4.1 酶标板定位调整 由于各种酶标板的尺寸略有差异，在使用时可调整运动工作台的弹性螺柱以定位酶标板： a) 酶标板装入运动工作台。 b) 将运动工作台手动轻推入仪器内，空出调整位置。 c) 用一字螺丝刀调整两个弹性螺柱，调整相同尺寸。 注意： 弹性螺柱的松紧程度以调节到——左右摇酶标板时不晃动，酶标板可以轻松放入工作台，按下酶标板时弹性螺柱处不响为准。 4.2 开机启动 仪器开机，系统进入自检状态，完毕之后进入主界面窗口。 4.3 关机 a) 当天样本测试完毕或每天下班前关机时必须执行关机程序。 b) 点击主界面中的“关机”，选择“确认”，仪器屏幕会显示“谢谢使用,请关闭电源”的提示，此时关闭仪器后面板的电源开关。 c) 若此时不想关闭仪器，选择“取消”图标，仪器将返回主界面窗口。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第52页共99页 4.4 输入操作 仪器采用触摸屏和笔作为基本输入设备，用户用笔在屏幕范围内进行相关的操作。用户用笔进行操作时，屏幕上的箭头会随之移动。如果点击的位置与箭头所指位置偏差较大，则需要重新标定触摸屏，具体操作请参考“系统设置”一章。另外交流电源的接地必须良好，否则有可能会影响到触摸屏的灵敏度。 4.5 输入方式 基本操作方式采用触摸笔单击的方式。 单击：用笔轻触屏幕后提起；所有的按键，列表项选择，输入框选择均为单击操作。 注意： 如果用户超过五分种未使用仪器（即未对触摸屏有任何动作），则仪器会自动关闭LCD屏的背光以节省电源，此时用户只需用触摸笔单击一下屏幕， 4.6 样品测试 4.6.1 布板参数设置 在主菜单中按“样品测试”键，进入布板参数设置界面： 布板方向：横向或纵向。 进板方式：选择连续方式（<6秒）提高测量速度，选择步进方式（<17秒）以获得更高的测量精度。 振板参数：振板速度分快速、中速和慢速3档，振板时间5S、10S、15S可选；也可以选择不振板。 设定完以上参数后，按“确定”键，进入布板设置窗口。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第53页共99页 。 4.6.2 选择测试项目 乙肝五项 进入布板设置窗口后，系统默认选择“乙肝五项”测试项目。选择该项目后可以同时将乙肝五项布在同一块板上进行测试，这五个项目分别是“项目设置”窗口列表中序号为 1-5 的五个项目（即前5个项目）, 布板时这五个项目分别布置在孔板的第 1-5 排（即第1排布HBsAg，第2排布HBsAb，第3排布HBeAg，第4排布HBeAb，第5排布HBcAb）。每排必须最少布1个与该项目对应的阴性对照品，阴性对照品可以布置在该排中的任意孔位，建议将这五项对应的阴性对照品布置在同一列的孔位上。在对“乙肝五项”项目进行样本布板（或删除）时，每次可以同时布（或删除）5个孔位（5个孔位处在同一列上），并且这5个孔位的样本号相同（样本号相同表示同一个病人），这样同一列的5个孔位就表示布的是同一病人的乙肝五项。 “乙肝五项”的布板限制: a) 不允许布空白孔 (双波长) ； b) 不允许布标准孔； c) 不允许布质控孔； d) 整板的阴阳性对照孔数量最多分别是 10 个，最少分别是 1 个，样本孔数量至少为1个。 e) 使用“乙肝五项”测试时, “全选”按钮不会清除布板状态, 此时选择起止孔位时要注意, 不能覆盖之前布的孔位。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第54页共99页 注意：“乙肝五项”的阴阳性对照品可由用户自行设置或不设置，当本次测试不设置对照品时仪器将采用历史保存的对照值计算本次测试的结果，但在第一次使用本仪器或每次更换测试试剂后乙肝五项中的每一项必须设置对应的阴性或阳性对照品，以使每次测试结果准确可靠。此外，“乙肝五项”的测试项目只有在布板窗口的“新项目”中才能看到，在“项目设置”窗口列表中并无单独的“乙肝五项”项目，它实际是指“项目设置”窗口列表中序号为 1-5 的前五个项目。 其他测试项目 在布板设置窗口中时，按“新项目”键，弹出项目列表窗口，通过点击上下箭头，可以从中选择包括“乙肝五项”在内的其他测试项目。 4.6.3 布板 URIT-660酶标分析仪允许用户在96孔板范围内任意设置孔位。窗口上方是孔类型选择开关，用户先选择要设置的孔类型，然后在孔位上直接点击即可。 孔位标记符号：样本：1-999 空白：B 阴性对照：NC 阳性对照：PC 标准：S1-S8 质控：QC 1) 样本 用户任意点击欲设置为样本的孔位，样本号从1起自动递增并显示在该孔位上。如果要修改样本号，可再次单击该孔位，在弹出的窗口中重新输入样本号即可（最大值999）。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第55页共99页 注意： 在同一天里，每个病人用唯一确定的样本号来标识，不同病人的样本号不能重复，同一项目需要进行多板测试时，样本号也不能重复，否则系统在打印综合报告时将作为同一病人处理 2) 空白 空白孔在项目测试中用以吸光度调零，即其它孔位的吸光度均要减去空白孔吸光度值。根据不同项目测试的要求，用户可以选择是否设定空白。 旧空白的保存和使用：空白孔的测试结果将自动保存，如果在同一项目的后续测试中不重新设定空白，则系统自动调用旧空白进行计算。 每个项目只允许设置一个空白孔，如果用户在设置空白孔时多次点击不同的孔位，则系统会提示警告：“空白已满！”。若用户想更换空白孔位置，则必须先删除已布的空白孔后才能重新布置空白孔。 注意：同一项目，在采用Abs和Cut-off这两种计算方法上对空白孔的使用是不同的。在Abs法中，如果布板时没有设置空白，则样本吸光度值为实测值，无需减去旧空白孔吸光度值。只有在设置了空白孔后样本吸光度值才要减去空白孔吸光度值。但在Cut-off法中无论空白孔设置与否，样本吸光度值均要减去空白孔吸光度值。 3) 阴性对照 只有在计算方法为Cut-Off的项目中才有效。根据Cut-Off公式 ，用户必须设置阴性对照，每个项目最多允许设置5个阴性对照，当阴性对照个数多于5个时，系统会提示“阴性对照个数已满！”。 项目测试时对照孔的吸光度和相应的Cut-Off值计算结果将被自动保存，在同一项目的后续测试中，如果不重新设定对照，系统将使用旧Cut-Off值进行定标。 4) 阳性对照 与阴性对照设置类似。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第56页共99页 5) 标准 在项目设置需要标准品定标进行定量测试时有效。如果该项目已经有旧标准存在（旧标准的查询请参见前一章的标准查询一节），用户可以选择不设定标准品(使用旧标准定标)或重新设定全部标准品，不允许只设定部分标准品的情况出现。用户依次点击标准品孔位，系统也依次将其标记为S1,S2…，所有标准品设定完毕，如果用户欲再次点击布置标准品，系统会提示“标准品数量已满”。如果标准品未设置完毕用户就开始测试或添加新项目，系统会提示“标准品数量不足”。 注意：如果某一项目测试中设置了标准品，而且定标结果正确，新标准将覆盖该项目的旧标准。 6) 质控 质控测试中，质控品的设置数量不受限制。 7) 删除 如果用户需要删除已设定的孔位，按下“删除”键后，用触摸笔直接点击当前已设置的孔位即可将其删除，然后根据需要重新设置。 注意： 在布板期间，当从一个项目切换到另一个项目时，系统会弹出“更改项目将删除当前布板状态！”提示，按“确定”将删除当前布板状态并将切换到一个新项目，按“取消”将保持当前项目布板状态。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第57页共99页 8) 全选 利用“全选”功能，可以快速地进行大批量样本的布板。 按“全选”键，系统提示“全选将删除当前布板状态”，按“确定”键进入 在窗口中输入起始样本号（1-998）,起始孔位（行号和列号）和截止孔位（行号和列号），输入完毕后按“确定”键，则整板所有选中孔位均被设定为样本。起始孔样本号为输入的起始样本号，其它孔位的样本号按布板方向依次递增。 使用全选功能时，原来已设置的所有项目和孔位将全部被清除（乙肝五项除外），所以如果要设置标准或对照，请在全选之后进行。 9) 全删除 按“全删除”键，系统弹出全删除确认提示，按“确定”将清除原先设定的所有项目及其孔位，按“取消”返回。 10) 开始测试 在布板设置窗口中按“开始”键，系统确认布板无误后，开始进行走板测试。 测试过程中如果有错误发生，系统会自动弹出错误提示信息。按“停止”键可以取消当前测试，返回当前布板窗口，同时酶标板托盘自动复位。 11) 吸光度显示 走板测试结束后，系统自动进入吸光度结果显示窗口 由于显示窗口大小限制，只显示了1-6列结果，可通过按左下角的“下一页”键切换查看7-12列结果。窗口中每一格内有2行显示，分别代表样本号（或孔类型）和吸光度结果，未布板的孔位无显示内容。 注意： 如果测得的吸光度大于3.200A，则显示为3.200*，并按3.200计算；小于0.000A则显示0.000*，按0.000计算。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第58页共99页 i. 定量结果显示 在吸光度显示窗口中按“结果”键，显示定量结果 定量结果同样也分2行显示，每一格内第一行显示定性结果，第二行显示定量结果，标准和对照孔无定量结果。 12) 整板测试结果打印 在吸光度测试结果窗口中按“打印”键，可以将当前测试的整板结果（包括孔位、检验项目、样本号、定量结果、定性结果等）通过内置记录仪或外置打印机输出打印。 13) 测试结果保存 在吸光度测试结果显示窗口中按“返回”键，系统将自动把该板测试的结果保存到历史数据库中。URIT-660酶标分析的历史数据库容量为16个项目、10000个病人和10000个样本，如果插入新的记录时数据库容量已经达到上限，则系统将自动清除最早的记录以释放空间来存放新的数据。 注意： 由于数据库容量的限制，在某些单日大批量测试的情况下，必须进行分批测试并输出报告，以免当天前面部分测试的结果被覆盖。 （五）质控管理 为了使仪器能够始终保持良好的工作状态，必须对仪器的测量系统进行必要的质量控制。 5.1 基本操作 在主菜单中按“质控管理”键，进入质控管理窗口。 5.2 质控设置 在质控管理窗口中按“质控设置”键进入质控设置窗口，在项目列表框里选中要进行质控的项目，然后选中质控方法，在批号输入框里输入质控批号，按“确定”键保存设置 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第59页共99页 5.3 “L-J法+Westgard多规则”方法设置 “L-J法+Westgard”多规则方法有四种判断规则对质控数据是否失控进行判断，用户可以根据需要进行单项设置，也可以组合设置。 5.4 即刻法设置 选中“即刻法”按钮就可以对以后进行质控测试的数据按即刻法进行质控判断。 注意：每改变质控方法设置，必须清除数据，否则对数据的判断将是无效的。 5.5 删除本月质控数据 在项目列表框中选中一个项目，按“删除本月质控数据”键，系统提示“确定删除？”，按“确定”键确认删除选中项目的本月所有质控数据。 5.6 质控查询 a) 查询操作 在质控管理窗口中按“质控查询”键，进入质控查询窗口。 从项目列表框中选中要查询的项目，从月份选择框里选择要查询的月份，按“确定”键可以查询出质控图。 注意：如果选中的项目对应月份没有做质控测试，则查询时系统提示“本月无质控数据”，不能进行查询。 b) 质控图打印 仪器提供通过质控图形的直观方式来观察仪器质控数据的分布、偏差和趋势。仪器提供的质控图形采用普遍推荐的LEVEY-JENNINGS图形，它是一个单边高斯正态分布图，正负两个标准差处于分布图的两条虚线处，平均值位于分布图的中线，每个LEVEY-JENNINGS 图最多可以绘制31个点。 按“打印”键，可以将当前项目的LEVEY-JENNINGS 图打印出来。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第60页共99页 （六）保养与维护 要保持仪器长期处于良好的工作状态，达到仪器所设计的测量精度，减少仪器出现故障的频率，延长仪器的使用寿命，必须对仪器进行细心的日常保养与定期维护。 按照仪器在使用过程的保养、维护需求，我们将仪器的预防性保养时间表划分为日常和每年的例行保养及根据实际需要的针对性保养和维护。 警告： 如果使用此仪器的各个医院或机构不实行一套规范的维护计划,则会造成仪器失效。 在保养、维护时，操作者必须戴干净无尘手套。若不能保证无尘，应当使用清洗液清洗，若灰尘落入仪器内会导致仪器发生故障。 6.1 日常保养与维护 6.1.1 仪器常规保养 1）保证仪器持续的稳定性和准确性，应避免干扰光学系统的任何部件，光路的调校错误会影响测量结果。 2）保持光学系统的清洁，以确保正常功能和结果的准确，应避免任何液体流入仪器内部，并防尘、防止其它外源性物质，不要用手指摸透镜表面、滤光镜、光电检测器。 6.1.2 仪器常规清洁 1）关掉仪器，并拔掉电源插头。 2）使用一次性手套，用一次性擦布沾水或温和去污剂，清洁仪器外部、导轨和板架。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第61页共99页 注意： 禁止使用具有腐蚀性的酸、碱和强挥发性的有机溶剂如丙酮、乙醚、三氯甲烷等擦洗仪器表面，只能使用中性洗涤剂。 6.1.3 每年保养与维护 每年良好的保养、维护，对于保持仪器良好的工作状态，延长仪器使用寿命是十分必要的。由于每年保养、维护工作的要求较高，应由优利特公司授权的工程师进行。每年保养、维护前请于优利特公司用户服务部联系。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第62页共99页 深圳雷杜RT-3100洗板机的标准操作程序 【目的】 规范洗板机的操作程序，保证洗板机的正常状态。 【适用范围】 本实验室洗板机的操作。 【操作人员】 本实验室实验人员。 【操作步骤】 设置板型 在系统主菜单，选中“板型设置”，按开始键，进入板型设置程序；按△、▽键选择参数，按＋、－键修改参数。 切换清洗瓶 在系统主菜单，选中“切换清洗液”，按开始键，进入清洗瓶切换程序；按△、▽键选择参数，按＋、－键修改瓶号或者切换时间（充盈时间）。 自动清洗 在系统主菜单，选中“洗板”，按开始键，进入程序参数确认界面。按△、▽键切换程序代号、设置和瓶号；按＋、－更改程序代号或洗液瓶编号。浏览程序参数设置，如果参数不正确，选中“设置”，按开始进入参数设置程序进行修改，主要参数如下： 板型设置：选择已设置好的板型参数（由A设置板型中完成）；或者选中“设置”按开始键进入板型设置程序； 清洗次数：可选1~99次，用＋、－键设置。多于2次（包括2次）时，需设置最后一次洗板参数。 清洗方式：有行洗和板洗两种方式，用＋、－键切换。 清洗行数：按实际板型进行设置，用＋、－键调整。（12针默认8行，8针默认12行） 吸液方式：有单吸和双吸两种方式，用＋、－键切换。 每孔液量：按＋、－键调整注入单孔的洗液量。（一般为350ul~400ul） 底部冲洗：按＋、－键设置是否进行底部冲洗。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第63页共99页 吸液时间：按＋、－键设置吸液时间，0.1秒到10秒可调。（一般为1.5秒） 震板时间：按＋、－键设置震板的时间，0秒到23小时59分59秒可调。 浸泡时间：按＋、－键调整洗液浸泡样本孔的时间。（按试剂说明书要求输入） 设置好后，按开始进入清洗位置设置窗口，按＋、－键设定要清洗的行数。按开始开始清洗，按返回可中止清洗过程。 单步抽吸/分配 在系统主菜单，选中“单步”，按开始键进入抽吸/分配程序；或者直接按单步进入抽吸/分配程序。在“功能”参数栏，按＋、－键切换抽吸或者分配功能。 抽吸：按设定参数，从微孔板的指定孔位吸干液体；分配：按设定参数，往微孔板的指定孔位注入液体。 关机 选中“关闭系统”，按开始将自动保存当前洗板使用的程序，并用蒸馏水冲洗管路；完成后提示关闭电源，此时关闭洗板机右后方的电源开关即可。同时，也可直接关闭电源开关，但不会冲洗管路和保存程序编号。 【洗板机的维护保养】 在系统主菜单，选中“充盈”或者“冲洗”，按开始键可启动充盈或冲洗操作；或者直接按充盈或冲洗键也可启动充盈或冲洗操作。仪器用蒸馏水“冲洗”可保持管路通畅清洁。 平常不用时，拔掉电源插头。 每天洗板机工作结束时，要对内外其进行清洁，用湿抹布擦洗洗板机的外壁及载物台，以保证其洁净。用蒸馏水将所有的管道清洗一遍，防止洗液的结晶堵塞管道。 及时倒弃废液，以免废液瓶过满致使废液回流而造成洗板机的故障。 保证待洗的反应板的孔边缘不要过高且水平，以免造成吸液针损伤。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第64页共99页 可调式移液器的标准操作程序 【目的】 规范仪器设备的操作程序，保证加样器的正常状态。 【适用范围】 本实验室加样器的操作。 【操作人员】 本实验室实验人员。 【操作步骤】 一、设定容量值：转动加样器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可提高设定移液量。顺时针方向转动旋钮，可降低设定移液量。在调整设定移液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意使移液器显示的数值不超过其可调范围。 二、预洗：当装上一个新吸头时应预洗吸头，先吸入两次液体并排回原容器中。 三、吸液： 1、选择合适的吸头安放在移液套筒上，稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙。 2、取液之前，所取液体应在室温（15℃－25℃）平衡。 3、把按钮压至第一停点，垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3毫米处,然后缓慢平稳地松开按钮,吸入液体，等一秒钟，然后将吸头提离液面，贴壁停留2-3秒，使管尖外侧的液滴滑落。 四、放液: 1、将吸头口贴到容器内壁并保持10～40度的倾斜。 2、平稳地把按钮压到第一停点,等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第65页共99页 3、压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 4、松开按钮。 5、按吸头弹射器除去吸头。 五、加样器吸嘴为一次性使用。 【加样器的维护保养程序】 加样器应根据使用频率进行维护，但至少应每3个月进行一次，具体方法如下： 1、一般维护可用中性洗涤剂清洁，或者用60﹪的异丙醇，然后用蒸馏水反复洗涤，去除洗涤剂或异丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。 2、如果有液体进入加样器内的严重污染，可将加样器拆开后进行清洁，具体拆开步骤参照加样器说明书。 3、高压消毒，有的加样器的吸管部分可高压消毒，但需注意的是消毒时不可超温超时，也不能挤压放置，以免造成变形。 4、可调式移液器在不使用时应妥善地竖立放于支架上，远离潮湿及腐蚀性物质。 5、在移液操作过程中为防止液体进入加样器套筒内，必须注意：压放按钮时保持平稳；加样器不得倒转；吸头中有液体时不可将加样器平放。 6、每天开始工作之前应检查移液器的外表面是否有灰尘或污物，若有则小心抹去 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第66页共99页 安徽航天SSC-1500ⅡB2生物安全柜的标准操作程序 【目的】 生物安全柜在制药、医疗生物以及工业实验室等领域起到非常重要的作用。使用生物安全柜的目的是使工作人员及其工作环境免受生物细菌的危害，因为在各种致病性微生物的环境下工作将会直接威胁到人的生命安全。 【适用范围】 Ⅱ级生物安全柜主要用于临床、诊断、教学和群体中出现的与人类严重疾病有关的广谱内源性中度风险生物因子进行实验诊断时的操作的。 【操作人员】 本实验室所有实验人员。 安全柜操作说明 航天生物科技有限公司 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第67页共99页 1、 时间设置键 用来设置系统的时间。 2、 移动控制键 用来移动系统的时间，与时间设置键配合使用。 3、 时间调整键 用来设置系统的时间，增加或减少，与时间设置键配合使用。 4、液晶显示屏 显示安全柜的各个工作状态，包括当前使用时间、预约定时开关机、累计工作时间、过滤器的寿命损失、风机的工作状态、下降气流流速、流入气流流速、排风气流流速、压差、温度、湿度、玻璃门状态、脚踏开关状态、插座、照明、杀菌，操作者可以随时监测设备运行情况。 5、 公司标志 表示安全柜的品牌。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第68共99页 6、 电源开关 按下电源键后，控制系统通断电。 7、 紫外灯 按下此键紫外灯开启，在液晶显示屏上显示紫外灯工作状态，再按下此键，紫外灯关闭。 注意：当紫外灯打开时，风机、玻璃门无法开启。 8、 风机 按下此键风机开启，在液晶显示屏上显示风机的工作状态，再按下此键，风机关闭。 注意：当玻璃门关闭、风机运行时，紫外灯可以开启，紫外灯开启后，风机即被关闭。 9、 玻璃门开启 按下此键玻璃门开启向上移动，到达标识处（正常工作时玻璃门的开启高度200mm），应按下此键，玻璃门停止，如果超出标识高度时，声光报警系统启动，提醒用户玻璃门超高，也可通过脚踏开关对其进行调控。 注意：当玻璃门开启时，紫外灯无法开启，防止对人体造成伤害 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第69页共99页 10、 照明灯 按下此键照明灯开启，在液晶显示屏上显示照明灯的状态，再按下此键，照明灯关闭。 11、 插座 按下此键插座通电，液晶显示屏上插座图标灯亮，再按下此键，插座断电。注意：插座只有在防水盖板放下时才能防水，操作时应谨慎处理。 12、 玻璃门关闭 按下此键玻璃门向下移动，直到到达底部位置，玻璃门停止。也可通过脚踏开关对其进行调控。 【操作步骤】 1、生物安全柜电源为220V、50Hz，柜体后部下方有接地标志，必须做到可靠接地后方可使用，以确保安全，生物安全柜配备熔断器为F10Aφ5*20㎜，共1只，位于箱体后部右下端电源线出口旁，是该设备总电源的熔断器。 2、使用前请检查各部位电源是否接好，有外排风机的，请检查外排风机是否装好。 3、打开电源锁，按下控制面板上的[电源]键，系统通电进入待命状态，液晶屏上显示当前的时间、温度、湿度、预约开机或关机时间、压差。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第70页共99页 4、按下[紫外灯]，开启紫外灯消毒30分钟后将紫外灯关闭。（注：此时玻璃门应是关闭状态） 5、按下[玻璃门开启]，打开玻璃门到标识处。 6、按下[风机]，开启风机约15分钟左右，使操作区达到规定的洁净度。 7、按下[照明]，开启照明灯，操作人员方可进行工作。 8、工作结束后，应关闭风机、玻璃门，打开紫外灯消毒30分钟，以杀灭残留在安全柜内部的病菌。 9、关闭紫外灯，打开玻璃门，清洗工作台面及集液槽。 10、关闭电源。 简易流程 按下控制面板上的[电源]键→按下[紫外灯]，开启紫外灯消毒30分钟后将紫外灯关闭→按下[玻璃门开启]，打开玻璃门到标识处→按下[风机]，开启风机约15分钟左右→按下[照明]，开启照明灯，操作人员方可进行工作→工作结束后，应关闭风机、玻璃门，打开紫外灯消毒30分钟→关闭紫外灯，打开玻璃门，清洗工作台面及集液槽→关闭电源。 【生物安全柜的维护保养程序】 妥善进行生物安全柜的维护，可以为实验室提供有效的安全保障。具体方法如下： 1、 日常维护可用70﹪的乙醇，或其他中性洗涤剂将生物安全柜的内、外部进行彻底的擦拭。清洗时先断电，防止消毒剂引起电器导电。 2、定期检查生物安全柜的硬件设备是否有损坏故障产生。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第71页共99页 3、在生物安全柜工作时，通常打开前视窗检查其报警系统是否正常。正常情况下，这样做会引起报警系统报警。 4、不要用过强的清洁剂清洁柜体外部，强溶解性或强磨损性清洁剂可能会损坏生物安全柜外表面的粉体膜层。 5、不锈钢上顽固的污渍清除时，可以用MEK（甲基-乙基-酮）。但是，必须在清除污渍后立即用清水和中性清洁剂进行清洗。不锈钢的定期清洗，可以保持和维护生物安全柜的优质表面。 6、检查日光灯和紫外线灯管，确定他们的正常工作。日光灯和紫外线灯管在长时间使用后，可以用酒精擦洗灯管表面的污渍，注意先断电，以防触电。紫外线灯应每年更换一次，以保持最佳的消毒灭菌效果。 7、定期检查生物安全柜的外壳是否有缝隙，发现缝隙可以用密封胶密封。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第72页共99页 电热恒温水浴箱操作规程 1. 概 述： 本电热恒温水浴箱主要用于科研单位、医疗单位及化验所检查化验病理血清等用。 2. 技术性能： 工作环境：常温常压条件下正常工作。 技术指标：温度调节范围：37℃~65℃ 温度波动：±1℃ 温度均匀性：±1℃ 3. 使用方法： 3.1使用是必须加入温水，可缩短加热时间和节约用电。 3.2打开电源开关，电源指示灯亮表示电源接通。 3.3旋转恒温控制器旋钮，加热指示灯亮表示电源接通，当温度表上的温度达到所需使用的温度时，将恒温控制器的旋钮调整在恒温指示灯忽亮忽熄点，待数分钟后即能自动恒温控制。 3.4恒温控制器的刻度，仅可作温度对照指示，并非温度指示刻度 4. 点检程序： 4.1 为保证水浴箱温度的 准确性必须每日使用温度计测量水浴箱内水温，并做好日温度记录。 4.2每半年由设备科检测校正一次，且附有原始记录。 5. 注意事项： 5.1箱外壳必须有效接地。 5.2在未加水前，切勿开电源，以防止电热管内的电热丝烧坏。 5.3非必要时，请勿拆开右册盖板，以利安全。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第73页共99页 长沙湘智XZ-4A离心机操作规程 1. 仪器分析原理和适用范围 1.1 原理：主要利用其高速旋转时产生的高离心力场的作用，可将不同大小或不同密度的颗粒分开。颗粒是指细胞、细胞器或病毒、大分子等。 1.2 适用范围：血清、血浆或体液标本的离心处理。 2. 仪器性能参数 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 最大转速：4000rpm 时间控制：0-99min／连续／短时运转 最大容量：24×10m1 噪音：＜57dBA(最大转速时) 最大离心力：2600g 尺寸(DxWxH)：480mm×400mm×310mm 重量：22Kg 3. 操作规程 3.1 样品准备：未抗凝标本垂直放置30-60分钟后离心。 3.2 标本配平。 3.3 标本放入离心机。 3.4 盖上离心机盖，锁上安全锁。 3.5 打开离心机电源，设定离心转速及离心时间。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第74页共99页 3.6 一般检测项目的未抗凝血离心3000转（rpm）5分钟或2400转（rpm）15分钟。抗凝血或特殊检测项目的样本离心按作业指导书设定。 3.7 待离心机转速停止后或离心转速降至0时，轻轻取出标本， 闭离心机电源。 3.8 离心后立即将标本转移至干净不含抗凝剂或防腐剂的试管， 时此管应具有可识别标签。 4. 维护保养项目：每日用软布和中性洗涤剂清洁仪器内外表面，离心转筒每周及需要时消毒。 5. 校准：厂家校准。 6. 相关记录：仪器使用记录、定期维护记录、期间核查记录、校准记录 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第75页共99页 上海三申YM-50A高压蒸汽灭菌器操作规程 （一）高压蒸汽灭菌器用途： 本灭菌器用于医院生物实验室等进行常规湿热灭菌。无需操作人员看管，全部灭菌过程可自动完成，工作结束后有声音提示。 （二）高压蒸汽灭菌器主要技术参数： 工作温度 灭菌时间 工作电压 额定压力 内桶容积 外型尺寸 （三）高压蒸汽灭菌器性能特点： 本灭菌器为内排汽式全自动控制，工作中产生的废汽由随机配代的废水桶回收，不会向屋内排放。门锁紧为搬捍推拉快速锁紧机构，锁门快捷轻便，并设有锁紧到位指示，确保安全。压力保险锁会在锅体内有压力时自动锁闭门盖。灭菌温度及灭菌时间可根据需要随意设定。本机工作温度采用压力式控制，工作时更为安全可靠。 126℃～ 129℃ 0～60分钟可调 AC 380V 3000w 0.25Mpa 50L 480×480×84 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第76页共99页 （四）高压蒸汽灭菌器使用方法： 1、安装:①本机下部设有脚轮，将本机推至合适地点后踏下脚轮刹车将其固定；②将本机配带的排汽管插入机器下部的排汽口一端放入随机配带的废汽回收桶内，并将桶内放入一些水使管口没入水中（任何水皆可，此水为工作时冷凝用水，水满时可倒掉）。 2、灭菌操作 : 2.1检查本机各部位有无异常并将各电源开关`按键使其处在关断状态，将电源插头插入插座。注：供电线路要满足15A的供电需求；2.2打开电源开关，电源指示灯亮； 2.3打开门盖，倒入蒸馏水至水位灯亮；同时将待灭菌物品放入。注意：每次开机前应观察水位灯是否点亮否则应及时补水防止干烧。2.4盖好门盖将门锁搬捍向左侧搬动，门位灯熄灭即可；2.5按需要设定好灭菌温度、灭菌时间，按下启动键，键灯及加热灯亮表示开始工作；2.6当温度到达灭菌温度时计时器开始计时，机内温度进入恒温状态，开始灭菌；2.7计时结束后，发出灭菌结束的声音提示并开始减压；2.8观察压力表指针为零时应及时打开门盖，取出物品，防止机内产生负压。2.9关闭电源开关，敞开门盖冷却锅体至室温后方可盖门待用。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第77页共99页 3、高压蒸汽灭菌器故障处理 ①工作进程中，若出现异常，按住故障键即可停止加热同时排除压力； ②机内压力超高时，超压保护系统会自动停止加热，压力回落后会自动恢复。 ③工作时如迂突然停电会终断本次工作程序。如若要取出物品可按住手动排阀压力减至零时可打开门盖。 （五）高压蒸汽灭菌器维护、保养和存放 ①本机工作用水尽量使用蒸馏水，特别是水咸较大的自来水不可用。（如使用自来水视不同水质而定可否）； ②锅体内底部的测水电极应经常保持清洁，特别是经常使用自来水的用户，应定期擦拭； ③电源开关设有漏电保护器，每月应进行一次漏电保护测试，以确保功能正常； ④本机若长期停用，应将锅体内及废水桶内的水排。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第78页共99页 室内质量控制的标准操作程序 【目的】 保证ELISA检测结果准确可靠, 充分发挥其方法学的优点。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：科主任、专业主管。 【方法】 【分析前质控】 一、人员培训 实验是人操作的，因此检验人员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方面的技术知识： 1、检验项目的基本原理（ELISA原理）。 2、临床意义。 3、熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点。 4、熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）。 5、熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。 二、室内质控血清的制备： 1、收集阳性血清(无明显溶血、黄胆、脂肪血和污染血清,到一定量（够本室使用3-6个月的量）。 2、传染性病毒阳性需经56℃、30分钟灭活后使用。 3、过滤，除纤维沉淀物。 4、稀释，用正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀释。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第79页共99页 5、测定值，与定值参考品进行对比、求值，一般定在Cut Off值附近的阳性值。 6、分装小瓶（每日用量），加盖、贴签，-20℃冻存备用。 【试剂盒选择】 必须使用经卫生部生物制品检定所检定合格，并贴有防伪标签的产品。 【试剂盒评价】 试剂评价需要有权威的血清考核盘（Panel）进行检测，价格昂贵，操作繁琐，一般实验室不易开展，可以通过以下信息，了解试剂质量。 1、根据该试剂生物制品鉴定所的批批检定报告，了解其质量水平，按照质量计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂。 2、通过询问试剂包被物的组成，如原料来源（基因工程或合成多肽），片段的组合（按比例混合或化学合成），片段的长短等判断试剂的优劣。 3、参考室间质评报告中对试剂的评价结果，了解不同试剂的质控成绩。 4、根据权威部门发布的试剂评价结果，了解市场上试剂的质量优劣。 【仪器质控】 为使仪器保持最佳工作状态应建立维护和校正仪器的标准操作程序（SOP），所要控制的仪器包括移液器（加样枪），水浴箱（温箱），洗板机和酶标仪。 1.移液器：ELISA加样量小（5-100ｕl），其准确性直接影响实验结果，利用称重法检查：吸取刻度指示量的水，万分之一天平称重后计算吸量是否准确，一般应在±10%以内。 2.水浴箱：经常检查水浴箱温度计所示的温度和水中（或温箱内）实测温度是否一致，允许有±1℃的误差。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第80页共99页 3.洗板机：每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定一般不超过2ul ，人工扣板时，垫纸不湿，定期检查管孔是否堵塞。 4.酶标仪：经常维护其光学部分，防止滤光片霉变，定期检测校正，使其保持良好的工作性能。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。 酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000～2.000，新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A值常以“*”或“over”或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000～2.900，而其线性范围仅0.000～2.000，这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。 【酶标仪校正程序】 1、滤光片波长精度检查：将不同波长的滤光片从酶标仪上卸下，用UV-2201型紫外-可见分光光度计（波长精度±0.3nm）于可见光区对每个滤光片进行扫描，其检测值与标定值之差为滤光片波长精度。一般酶标仪无585nm滤光片，可选用550nm或630nm滤光片。450nm 滤光片的检定选用普鲁兰溶液（校正波长为630nm）。 2、通道差与孔间差检测：通道差检测是取一只酶标板小孔杯（杯底须光滑，透明，无污染）以酶标板架作载体，将其（内含200ul甲基橙溶液吸光度调至0.500A左右）置于8个通道的相应位置，蒸馏水调零，于490nm处连续测三次,观察其不同通道的检测器测量结果的一致性，可用极差值来表示。孔间差的测量是选择同一厂家，同一批号酶标2板条（8条共96孔）分别加入200ul甲基 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第81页99页 橙溶液吸光度调至0.500A左右）置于8个通道的相应位置，蒸馏水调零，于490nm处连续测三次,观察其不同通道的检测器测量结果的一致性，可用极差值来表示。孔间差的测量是选择同一厂家，同一批号酶标2板条（8条共96孔）分别加入200ul甲基橙溶液（吸光度调至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸馏水调零,于490nm处检测，其误差大小用±1.96s衡量。 3、零点飘移（稳定性观察）：取8只小孔杯分别置于8个通道的相应位置，均加入200ul蒸馏水并调零，于490nm处每隔30分钟测一次，观察各个通道4小时内吸光度的变化。 4、精密度评价：每个通道3只小杯分别加入200ul高中低3种不同浓度的甲基橙溶解，蒸馏水调零，于490nm作双份平行测定，每日测二次（上下午各一次），连续测定20天。分别计算其批内精密度，日内批精密度,日间精密度和总精密度及相应的CV值。 5、线性测定：用电子天平精确称取甲基橙配制5个系列的溶液，于490nm平行测8次，取其均值。计算其回归方程，相关系数及标准估计误差S，并用±1.96S表示样品测量的误差范围。双波长测定评价：取一分甲基橙溶液，分别加入3种不同浓度的溶血液（测定波长为490nm，校正波长为585nm），先后于8个通道检测，每个通道测3次，比较各组之间是否具有统计学差异，以考察双波长消除干扰组分的效果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第82页共99页 【标本的采集和保存】 1、标本采集时应尽量避免溶血，因红细胞破裂可释放过氧化物酶活性物质干扰立可读方法的结果，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本会增加非特异性显色造成假阳性。 2、细菌污染的标本同样的道理也易产生假阳性，因菌体中可能含有内源性HRP也会产生假阳性反应。 3、抗凝不完全的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性，建议尽量不用抗凝血尤其是不使用用肝素抗凝剂。 4、标本在冰箱中保存时间过长易导致血清IgG聚合，使间接法的试剂本底加深，一般血清置4℃冰箱5天内完成测试。如需保存一周以上则要-20℃冰冻保存，冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，融解时应上下颠倒充分混匀，同时避免气泡。可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。反复冻融会使抗体效价跌落，如需保存作多次检测，宜少量分装冰冻保存。 5、ELISA的灵敏度＞1ng／ml水平上，标本间的污染要尽量避免，尤其不应与生化试验用同一管标本。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第83页共99页 【分析中质控】 ELISA实验的结果受操作影响很大，每个步骤包括加样，温育，洗涤，显色，酶标仪读数均应认真负责才能充分发挥ELISA的高灵敏，强特异的优点。因此，应建立实验项目的标准操作程序(SOP)。 一、加样 1、加样应用微量移液器（加样枪）按规定的量加入微孔板底部，避免加在孔壁上部，不可溅出，不可产生气泡。 2、每次加样应更换吸嘴，做到一人一吸头，以免发生交叉污染;干吸头预先在血清中抽吸三次。 3、样本稀释，目的是为了减少非特异性反应，所以一定要先加稀释液后加样本，特别注意加样后要在微量振荡器上振荡30秒钟，同时注意防止液体溢出。如后面操作步骤中加二种以上试剂时均需振荡混匀。 4、如用滴瓶滴加试剂应先将滴瓶摇匀并挤去第一滴有气泡的试剂后加样。 二、温育 1、抗原抗体反应需要在一定温度下（37°C），经过一定的时间才能达到反应的平衡点。 2、ELISA边缘效应是由温育形成的。所以温育一般采用能使反应液温度迅速达到平衡的水浴法。水要浸至板条的1/3处。 3、反应板不宜叠放，注意温育的温度和时间应按规定控制，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第84页共99页 三、洗涤 1、手工洗涤一般采用浸泡方法：1）甩去孔内反应液； 2）用洗涤液过洗一遍（即注满孔后即甩去）；3）微孔重新注满洗液后浸泡2-3分钟，间歇摇动；4）甩去孔内液体，拍板，用纸吸干。重复以上操作至少5次。注意各种试剂盒的洗涤液尽量不要混用。 2、洗板机洗板一定要预先把板架放平，使洗板机上的每个放液和吸液纤孔都能一致地插入孔底，将孔内液体全部吸干，同时要设置一定的浸泡时间。如出现机洗后拍板有较多残留液时应再用手工洗2次以上。关机前要用蒸溜水冲洗管道，避免堵孔。 四、显色 1、HRP催化底物的一步呈色反应，同样需要一定的时间和温度。 2、一定要按照说明书规定的时间温度（一般为37°C，10-15分钟）恒定反应后终止。 3、或根据临界值质控血清吸光度值达0.2左右使的时间而恒定反应时间。 五、酶标仪判读结果 1、显色反应终止后应立刻比色（30分钟内）。 2、常见的显色系统有OPD和TMB二种，以后者最为常见，而TMB酸不易终止因此必须尽快比色以免影响结果。OPD终止后显棕色，测定波长为490nm；TMB终止后显黄色，测定波长为450nm，二种底物的校正波长均用630nm。 3、使用双波长的优点可以消除反应板条上的划痕手印的干扰。同时要注意反应板应用纸吸干后才能置酶标仪中比色，否则吸光度易出现负值或损坏滤光片。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第85页共99页 【分析后质控】 【报告方式】 一、定性试验：国内外为便于统一计算，一律按S/COV方式报告，S为标本A值，COV即Cut Off值（或COV）。 1、夹心法和间接法以S/COV≥1为阳性；竞争法与中和法以S/COV﹤1为阳性。 2、COV的计算公式以试剂盒说明书的为准常见的有： 1）、COV=2.1×N（当N不足0.05时按0.05计），此公式由P/N>2.1换算而来，常用于夹心法。 2）、COV=0.5×N，从抑止率公式换算而来，常用于竞争，中和法。 3）、COV=N+C（C为常数），用于间接法。 4)、COV=C×P+N（C为常数），用于间接法。此公式最客观，但对厂家要求很高，阴阳性对照测定值要基本恒定。 二、定量分析：严禁用定性试剂盒做定量分析。 1、用已知量的系列标准品，绘制标准曲线，结果以绝对量或单位表示。ELISA的标准曲线每次都要和待测标本做在同一块板上。 2、现有的ELISA定量试剂盒标准曲线只有在较窄的浓度范围内成直线，要得到精确的结果实属不易。 【记录】 1、所有实验的原始资料均应存档；所有的记录均应规范登记在册；原始登记表应记录试剂来源、批号；质控血清的来源及测定值并注明是否在控；签上实验者姓名及审核者姓名。 2、如试验结果对临床诊断有决定意义，其样本应保留，至少与病历保存期一致 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第86页共99页 【定性试验】 ELISA定性试验的临床意义在于是否检出病原体，与检出量无关，因此QC要保证试验的灵敏度和特异性。生化的质控图方法仅能观察灵敏度而无法监控特异性。建议使用临界值血清界定法：将试剂盒所设的阴阳性对照作为内对照指示反应；另设临界值、高值质控血清，正常人血清作为外对照，与标本同时检测，临界值S/C.O≥1，高值质控血清S/C.O≥10，正常人血清A值在0.05～0.07之间。阳性质控血清失控（临界值为灵敏度，高值为“HOOK”效应监控）应重做阴性标本；阴性对照失控应重做阳性标本。以表格式记录每块板的外对照实验结果，作为QC资料存档。 【“即刻性”质控】 在开始进行质控时，只需要有3个质控血清测定值即可进行质控。当这组数据扩大到20次有效值时就可以计算RCV的X，S。方法： 1、先将测定值从小到大排列，X1最小，Xn最大； 2、计算X和S； 3、计算SI上限值和下限值。SI上=（X最小-X）/S，SI下=（X最大-X）/S； 4、对照SI表，检查是否出控，SI上、下限≤规定值，在控；SI上或下限＞规定值，失控。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第87页共99页 室间质量评价的标准操作程序 【目的】 采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果，并发现室内质控不易发现的不准确性，了解各实验室之间结果的差异，并帮助校正，使具有可比性。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 【基本概念】 【质量控制】 质量控制主要采用质控图进行。质控图是把某一检验的性能数据与所计算出来的预期的\"控制限\"进行比较的图。这种性能数据是在按规程正常进行时，按时间顺序而抽选出来的，其目的是检测检验过程中变异的可追查性原因。可追逆性的误差原因，是指除去随机误差以外的其他原因。在GLP概念里QC即指IQC，其定义为：由实验室工作人员采取一定的方法和步骤，连续评价本室工作的可靠性，旨在监测和控制本室常规工作的精密度，提高批内批间样本检验的一致性，以确定检验报告是否可靠或可否发出的一项工作。免疫测定方法的灵敏度和特异性要比生化方法高得多，因此QC手段不能照搬生化模式。质量控制是监视ELISA操作全过程，排除误差，维持标准化操作的一个管理过程。这一过程是通过一个反馈环路进行的： 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第88共99页 1、确定控制的对象； 2、规定控制对象的标准（预期值）； 3、制定或选择控制方法和手段； 4、测量实际数据； 5、比较或较对实际数据与预期值之间的差异，并说明原因。超出预定误差范围，报警系发出信号，反馈通道中断； 6、采取行动，解决差异。恢复原状（原标准状态）的手段发挥作用。 【灰区概念】 把定量分析的正常值范围引入定性分析建立灰区概念，即将COV值上下的一段区域定为阳性可疑，需重复实验或换试剂重测以确定其阴阳性，如仍落在灰区范围内则报告+（阳性）。灰区概念对血站系统的献血员筛查尤为重要。灰区的设置有二种： 1、COV×（1±CV），CV为该试剂的批内CV(一般在15-20%间)。 2、COV±2S，S为实验室做室内质控ROC的S。 【高值钩镰效应（HD-HOOK）】 在二位点夹心ELISA中，其剂量反应曲线的高剂量（HIGH DOSE，HD）区段，线性走向不是呈平台状无限后延，而是向下弯曲状，似一只钩子或一把镰刀（HOOK），MILES（1974）根据此现象写实性地称之为“HD-HOOK”效应。产生该现象的分子机理有“分子变构说”和“浓度效应”等推论。一步法和二步法均存在“HD-HOOK”效应，只是前者出现的更早些，大多数是高值低吸光度，很少阴性结果。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第89页共99页 【质量控制血清】 质控血清是已有靶值的血清，在每次的常规检验中加入一份或数份，通过所得结果来了解本次检验的情况。质控血清检验的结果如能控制其误差在一定范围内，就说明该检验没有发生不允许的误差。如果出现超过允许误差范围的异常结果，提示该检验不合格，应寻找原因，纠正后，重检待测标本。因此质控血清在质控工作中起重要作用。 卫生部临床检验中心制备的各传染病质控血清，可以在-20℃保持半年定值不变。冰冻状态融化使用时，应先混匀，未用完部分可在4℃保存5天。不宜反复冰融或自行分装。开展某项检验的室内质控工作需要的质控血清，一般按3-6个月用量准备。自制的不定值质控血清，在一批质控血清将用完之前，需准备下一批质控血清。质控血清要求性能稳定，较长期内效价不变，其理化性质应与病人样本相近，这样才能有效地起到监测作用。 质控制血清分定值和未定值两种。如只用一份质控血清定值，一般定在正常值与异常值交界点上，定性测定时处于弱阳性水平，称为临界值。各传染病质控物临界值的制定，应按临床要求，为临床提供统一的判断弱阳性的标准。临界值质控血清可以作为试剂盒中的阳性对照品和阴性对照品以外的第三个对照品，它可以灵敏地反映出试剂盒的检出水平，确保弱阳性反应的标本不漏检。 质控血清的制备，每个实验室可以根据自己的条件，选用临床中心提供的质控血清，或按以下方法自己制备本室使用的质控血清。 1、收集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。 2、56℃加热30分钟灭活。 3、离心或过滤除去沉淀。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第90页共99页 4、用10%的小牛血清或正常人血清（PBS缓冲液）将收集的血清稀释至所需的浓度。如能用正常的人血清稀释更好，因其成份更接近于检测标本。 5、抽滤除菌。按一次使用的量分装小安瓿，封口，20℃保存备用。不可反复冻融。被检物要求检出的水平常被认为是质控血清应选择的水平。如果该试验还有其它要求，则应加所要求浓度的质控物。 6、标定含量。20-30次测定结果删除＞±2SD数据的均值作为靶值，并与已知定值血清对比测定。 【室间质评的方法】 1、发质控物进行调查，这是目前国内外常见的形式，采用定期发放质控物至各实验室，各实验室在规定的日期进行检验，并将结果报至组织者（部、省临检中心）。组织者通过统计分析，再将评价结果寄回实验室，使其了解工作质量，发现问题，提高质量。其缺点为由于各实验室吃小灶或互相打电话修改结果而达不到真正评价作用。 这是国内外室间质评的常用形式。临检中心定期发放质控物至各实验室，各实验室在规定的日期进行检验，并将检验结果报至部临检中心。部临检中心经统计分析，将评价结果寄回各实验室。通过评价，各实验室了解本室工作质量，发现差距，并设法改进，以不断提高检验质量。 这种评价方式有一定缺点，即各实验室常对质控物特殊对待，在检验时选用特殊试剂盒，选派特别的技术员进行检验，有的实验室互相和对结果并作修改。这就使EQA的结果不能反映该实验室日常工作水平。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第91页共99页 2、现场调查，事先不通知，临时派出人员到各实验室，规定采用常规方法，检测一组标本，进行评价。这种方法可以解决实际问题，进行现场指导，组织者常因人力、物力的原因而不能经常性进行。派观察员到实验室进行试剂调查，这种调查事先不通知，临时派观察员到实验室，指定采用常规方法，检验规定的一组标本，进行评价。 【成绩计算方法】 1、定性试验：检验结果与预期结果一致，得100分，错误不得分，总计实验室的得分。从全部参评单位的得分中求出该批质控物平均分（X）和标准差（S），再通过公式计算出每一个实验室的得分比值（SI）。 SI=（实验室得分-平均分X）/平均标准差（S），SI在0.0-0.9间为良好,1.0-1.9间为优秀,SI为负值时数值越大成绩越差。 2、定量试验：SI=（实验室测定值-预期值X）/预期值的标准差S，SI越小，表明越靠近靶值，成绩越好。0-1.0为优秀,1.1-2.0为良好,＞2.0为差。SI无正负之分。 【质量改进（Quality Improvement，QI）】 质量改进的建议来源于三方面： 1、室内质控：提示实验的精密度差，应规范各项操作； 2、室间质评：提示实验的准确性差，应改进设备的准备或更换试剂； 3、病人或医生的报怨：提示实验的偶然误差，应分析实验的质控过程是否达标。 附：陕西省临检中心室间质评，2次/年，5个水平/次。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第92页共99页 实验室意外和事故处理 一、意外和事故 1、意外是指发生了未导致个人伤害偶然发生的危险，但也可能已经发生了伤害。 2、事故是指发生了人身伤害。意外和事故都可被分为小型的和重大的。 3、小型意外：少量潜在传染性物质漏到椅子上，常用于这种情况的有效处理措施是消毒污染处。 4、重大意外：任何情况下，如果怀疑有严重性的意外，都将被视为重要的，实验室必须被清空，锁上，并且实验室管理者要请教安全专家，听从他们的意见。 二、意外和事故的紧急处理措施 发生意外事故时，应立即进行紧急处理，并报告实验室负责人。 1、皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤处的血液，70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。 2、皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。 3、粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。 4、衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。 5、污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第93页共99页 6、低温蒸汽甲醛气体消毒 由于甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和实验室的常规空气消毒。如果实验室一旦发生了重大泼溅事故，应按严重情况处理，并采取以下措施： （1）、从污染处疏散人员，但要防止污染扩散； （2）、控制污染——锁门并防止进一步进入； （3）、通知实验室主管领导、安全负责人等，以便查清情况，确定消毒处理的程序； （4）、如果认为合适，可进行生物安全柜和/或实验室的低温蒸汽甲醛气体消毒，但生物安全柜和/或实验室必须有可靠的密闭性能，人员必须完全离开。【生物安全柜：25ml福尔马林和等量水混合后放在一个蒸发皿中使其在密封的生物安全柜中蒸发，保持至少6h，最好过夜。实验室：福尔马林和水的体积根据实验室大小而定】。具体操作可按说明书执行。 （5）、发生溢出后应离开房间约30分钟。穿防护服，被溅的地方用经消毒剂浸泡的吸水物质覆盖；消毒剂起作用10－15分钟后清理该地方。移走吸水性物质，用消毒剂冲洗该地方。 三、意外和事故登记、报告和检测，重大意外和事故必须进行登记，内容包括： 1、意外和，事故发生的时间、地点及详细经过。 2、处理方法和经过，包括专家或领导赴现场指导和处理的情况。 3、随访检测的日期、项目和结果。 4、意外和事故的报告和检测 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第94页共99页 5、发生重大事故时，在紧急处理的同时要立即向主管领导和专家报告。同时抽血检测该传染病，暴露后4周、8周、12周、6个月要定期检测。 6、发生小型事故时可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法报告主管领导和专家。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第95页共99页 保密制度程序 1 目的：确保患者的检验结果和专有权得到保护，维护患者的利益和实验室的信誉。 2 适用范围：（免疫室）实验室一切涉及患者的健康，信息专有权的信息保护工作。 3操作程序：实验室技术负责人负责接待患者来访和检测实验室工作过程中的患者检验结果和专有权的保护；负责有关结果报告单、检验记录等信息的保密工作（包括电子存储的患者信息）。全体检验科人员严格遵守本程序规定的保密措施。 3.1 保密内容：保密内容包括患者提供的信息、标本以及一切将对患者在商业上、专有权上、法律上以及个人隐私方面造成损失或危害的信息。同时也涉及到检测记录、检测结果等内容以及计算机中存储的信息。 3.2 保密措施： 3.2.1 结果报告程序：由免疫实验室人员将门诊化验单统一交给专人送至采血室和病房。 3.2.2科主任负责对实验室人员进行保护患者机密和专有权的教育。全体工作人员对上述规定的保密内容不得以任何方式向其它人员传递。 3.2.3 实验室技术负责人负责为患者服务过程中的患者信息和专有权的保护工作。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第96页共99页 3.2.4 实验室值班人员负责临床医生和患者查询信息的接待工作。临床医生只能查询本人直接负责的患者的信息，患者只能查询本人的信息。在查询前值班人员要查证查询人的证明文件（病志），并做好记录。不提供电话查询信息的服务。 3.2.5 非本室人员不得进入实验室。 3.2.6 贮存数据的微机设置开机密码和屏幕保护密码,存放实验记录的抽屉加锁。 3.2.7 对违反上述规定的工作人员，要查清问题并追究责任。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第97页共99页 应急处理程序 1 目的：在实际工作中，仪器设备发生故障、试剂盒发生质量问题时，为保证检验结果的准确性，及时、应正确采取应急措施，最大程度上避免或减轻不利影响。 2范围：适用于免疫实验室检测需要并可能对检验结果造成误差的仪器设备和试剂盒。 3 职责： 3.1 免疫实验室检测工作人员在职责范围内均有责任熟悉各种仪器和相关设备的性能、要求、维护和保养、常见故障的排除、尤其要严格按照操作规程操作。 3.2工作人员在职责范围内均有责任有意识地注意以求及时发现并报告仪器设备和试剂盒的异常情况。 3.3 作为应急处理，潜在着一定的可能影响检测质量的不确定因素。室主任负责在第一时间检查核实应急措施的有效性。 4 工作流程： 4.1 仪器设备故障： 4.1.1 室主任接到异常情况报警后，立即现场确认异常情况的性质：观察有误、误操作、偶发现象或确属不能立即排除的故障。 4.1.2 用红牌故障标志标示故障仪器，放置到其它实验室，以防被错误使用。 4.1.3 小型仪器送仪器部门维修，大型贵重仪器关闭电源开关，取下电源插头。用相应防尘罩遮蔽仪器。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第98页共99页 4.1.4 有满足要求的替用设备的，启用替用设备（准用仪器）。借用其他部门仪器设备时，及时联系借用并核实该设备的使用状态。替用、借用或备用设备的使用在满足质量要求的同时，必须同时满足实验室管理措施（特别是防污染）的要求。 4.1.5不能解决的问题，与及时与供应方会同解决。根据双方合同约定，及时通知供应方。供应方技术支持人员将在规定的时间内随身携带备用设备到达现场。 4.1.6 仪器维修后取下红色故障标示，换上未校准标示牌。 4.1.7 维修的仪器必须经验收合格并供需双方签名后才能重新启用。调试实验通过后，去掉未校准标示牌。 4.1.8 室主任须检查并随时跟踪所采取措施的有效性。 4.1.9 对未能及时排除故障时，必须及时上报科室，在科主任批准下，应积极联系附近的其他实验室（已经得到认可）检验，以满足病人和临床或科研需求。 4.2 试剂盒质量问题： 试剂盒质量发生问题，经核实后，及时通知供货商迅速更换另一批次试剂，使用前需先作质量检测，合格后方可使用。 4.3 仪器设备故障或试剂质量问题不能得到解决，预期将会影响到检测报告的及时发出，可将标本送至其它实验室检查；如已影响到报告的及时发出，应在门诊取报告处向病人公告或向相关病区公告，取得病人的谅解。 4.4 影响到检测报告发出的情况，应作记录。 陕西省水电医院检验科 免疫室SOP文件 责任部门：检验科 文件编号:SDYYJYK-SOP-MY1 版序：001 时间：2015-01-01 页码：第99页共99页 以上所有标准操作程序（SOP）的变动程序： 如该SOP任一使用者提出内容有不妥之处，可向该SOP的主管负责人提出，主管负责人则召集与该SOP相关的所有人员进行讨论，根据讨论结果提出修改意见或不修改意见。 如进行了修改，则应在该SOP文件结尾处的修改栏填入相应内容，要填入的栏目有：制定人、修改人、审核人（签名）、批准人（签名）及每个SOP文件后的修改栏均至少留有三次修改的空间供填写
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