2种方法检测尿液中胆红素、蛋白质、葡萄糖的准确性分析

ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２０．０４．０８

临床检验杂志２０２０年４月第３８卷第４期　ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＬａｂＳｃｉ，Ａｐｒ．２０２０，Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．４

２种方法检测尿液中胆红素、蛋白质、葡萄糖的准确性分析∗

韩启福，刁晓艳，聂静，李子安，彭海，阿祥仁（青海省人民医院医学检验科，西宁８１０００７）

·临床实验研究·

摘要：目的　用贝克曼ＡＵ５８３１生化分析仪验证ＳｙｓｍｅｘＵＣ⁃３５００尿液分析仪胆红素（Ｂｉｌ）、葡萄糖（Ｇｌｕ）、蛋白质（Ｐｒｏ）的准确度，探讨２种方法的一致性。方法　用贝克曼ＡＵ５８３１生化分析仪和ＳｙｓｍｅｘＵＣ⁃３５００尿液分析仪分别检测不同浓度标准参考液，评估２种方法检测Ｂｉｌ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ的准确度和符合率。收集本院住院患者新鲜尿液标本２０５份，分别用尿液分析仪和生化分析仪检测，用Ｋａｐｐａ检验分析２种方法的一致性。结果　２种方法检测Ｂｉｌ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ３个项目的总符合率分别为９６．６％、９９％、９４％，准确度验证均符合相关规定的要求。２种方法检测２０５份尿液样本Ｂｉｌ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ３个项目的Ｋａｐｐａ值分别为０．７８８、０．８４３、０．７４１。结论　Ｂｉｌ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ这３个项目在ＵＣ⁃３５００的半定量结果与ＡＵ５８３１的定量结果之间有较高的一致性。在没有尿液分析仪检测项目的标准液情况下，可以用生化分析仪验证尿液分析仪部分项目的准确度，可作为尿液分析仪准确度评估的替代方案。

关键词：尿液分析仪；标准参考液；准确度；符合率；一致性中图分类号：Ｒ４４６．１　　　　文献标志码：Ａ

　　ＳｙｓｍｅｘＵＣ⁃３５００全自动尿液分析仪（简称ＵＣ⁃３５００）以其操作简便、检测项目较多、检测速度快、数据管理系统化的特点在各类中小型医疗机构普遍应用。目前该仪器的检测项目只有比重项目有标准液，其他半定量检测项目缺乏标准液或标准品，其检测项目准确性难以验证。本文用贝克曼ＡＵ５８３１全自动生化分析仪（简称ＡＵ５８３１）来验证ＵＣ⁃３５００部分检测项目的准确性。１　资料和方法

１．１　一般资料　选择２０１９年１月本实验室患者血清标本３０份（直接胆红素≥１７．０μｍｏｌ／Ｌ），尿液检验样本２８９份，其中８４份用于基质尿液制作（选取常规体检中尿干化学检测各项目均为阴性，比重、ｐＨ值均在参考范围内的尿液），余２０５份尿液样本用于一致性分析。

１．２　仪器与试剂　ＵＣ⁃３５００尿液分析仪及其配套ＭＥＤＩＴＡＰＥＵＣ⁃１１Ａ试纸（批号ＡＣ８００６）、质控品（批号ＵＣＣ０１９０２）（日本Ｓｙｓｍｅｘ公司）；ＡＵ５８３１生清蛋白检测试剂（批号：ＡＵＺ６５３１）、葡萄糖（Ｇｌｕ）检测试剂（批号：ＡＵＺ６１４６）、生化多项质控品ＣＯＮＴＲＯＬＳＥＲＵＭ１（批号：１０４１Ｃ）和ＣＯＮＴＲＯＬＳＥＲＵＭ２（批号：１０４２Ｃ）、生化多项校准品（批号：化分析仪、直接胆红素检测试剂（批号：ＡＵＺ６７８２）、

１１２１Ｄ）（美国贝克曼公司）；重组人血清蛋白（杭州纽龙公司）；葡萄糖粉（中国大冢制药公司）。１．３　方法

１．３．１　质量控制　ＵＣ⁃３５００及ＡＵ５８３１均在计量检定周期内完成校准，且校准结果符合相关规定的要求，ＵＣ⁃３５００每日检测标本前室内质控结果均在控（在说明书标注的质控限范围内），ＡＵ５８３１室内质控累积变异系数（ＣＶ）均在实验室目标ＣＶ范围内１．２３％），参加青海省临床检验中心和国家卫健委临床检验中心室间质评的结果均为１００％。

１．３．２　参考标准液配制　按照ＭＥＤＩＴＡＰＥＵＣ⁃１１Ａ说明书中测定结果判定表中标示浓度范围，将重组人清蛋白和葡萄糖用蒸馏水配制成接近说明书中检测上限的浓度。挑选在ＡＵ５８３１上已经检测过的直接胆红素高值血清样本，结果接近说明书中测定范围表中检测上限。将上述样本按说明书等量级的半定量值用基质尿液按比例稀释，每个梯度至少稀释成１０ｍＬ，稀释后不同浓度梯度的样本在ＡＵ５８３１检测，每个梯度检测３次，测得结果在尿液分析仪等量级的半定量值附近时则为标准参考液制作完成，３次结果的均值为标准液参考值。Ｇｌｕ、蛋白质（Ｐｒｏ）、胆红素（直接胆红素）３个项目标准参考液浓度及对应量级见表１。

（直接胆红素：１．４６％、清蛋白：１．３１％、葡萄糖：

　　　　作者简介：韩启福，１９８２年生，男，主管技师，大学本科，从事临床体液学、血液学检验工作。　　　　通信作者：阿祥仁，主任医师，硕士研究生导师，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｘｉａｎｇｒｅｎａ００１＠１６３．ｃｏｍ。

∗

基金项目：青海省２０１８年创新平台建设专项项目（２０１８⁃ＳＦ⁃Ｌ３）。

临床检验杂志２０２０年４月第３８卷第４期　ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＬａｂＳｃｉ，Ａｐｒ．２０２０，Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．４　　表１　葡萄糖（Ｇｌｕ）、蛋白质（Ｐｒｏ）、胆红素（直接胆红素）项目标准参考液浓度及对应量级（示值）

项目＋－

（直接胆红素）０．５１．０２．０－

８．６

胆红素

葡萄糖ｍｇ／ｄＬｍｍｏｌ／Ｌ１００２５０２０００５００５０

２．８５．６１４１１１２８

蛋白质（清蛋白）ｍｇ／ｄＬ１５３０１００１０００３００

０．１５０．３１．０１０．０３．０ｇ／Ｌ

·２７１·

与相应参考浓度的标示值相差同向不超过一个量级，不得出现反向相差；且阳性参考溶液不得出现阴性结果，阴性参考溶液不得出现阳性结果为符合标准。符合率判断标准：按ＭＥＤＩＴＡＰＥＵＣ⁃１１Ａ说明书中要求，检测结果的符合率不低于９０％。１．３．４　一致性分析　随机收集我院住院患者２０５份尿液样本在ＵＣ⁃３５００上检测完成后，１ｈ内在ＡＵ５８３１上检测直接胆红素、葡萄糖、清蛋白３项，收集数据后按照ＭＥＤＩＴＡＰＥＵＣ⁃１１Ａ说明书，对ＡＵ５８３１检测的结果进行半定量人为分级（见表２），统计分析２种方法检测结果的一致性。

１＋２＋３＋４＋

ｍｇ／ｄＬ－μｍｏｌ／Ｌ－１７３４－

　　注：－，仪器及配套说明书中未标示。

１．３．３　准确度和符合率验证　将不同浓度梯度的标准参考液在ＵＣ⁃３５００上各检测２０次，统计后分析评价符合率和准确度。准确度判断标准：检测结果

表２　２种方法检测胆红素（直接胆红素）、葡萄糖、蛋白质（清蛋白）结果的分级方式

项目分级１级２级３级４级５级６级

ＵＣ⁃３５００

－１＋２＋３＋ＮＮ

胆红素（直接胆红素）

０～４．３＞２５．６ＮＮ

ＡＵ５８３１（μｍｏｌ／Ｌ）１２．９～２５．６４．３～１２．９

ＵＣ⁃３５００ＡＵ５８３１（ｍｍｏｌ／Ｌ）

－０～１．４＋－１．４～４．２１＋２＋３＋４＋

４．２～９．８＞４２．０２１．０～４２．０９．８～２１．０葡萄糖

ＵＣ⁃３５００

－＋－１＋２＋３＋４＋

蛋白质（清蛋白）

ＡＵ５８３１（ｇ／Ｌ）０．０７５～０．２２５０．２２５～０．６５０．６５～２．０２．０～６．５＞６．５０～０．０７５

１．４　统计学分析　用ＳＰＳＳ２２．０软件进行。计数资料以ｎ表示，采用一致性检验（Ｋａｐｐａ检验）比较２种方法检测结果的一致性；Ｋａｐｐａ结果判读：Ｋａｐｐａ计算结果为－１～１，但通常Ｋａｐｐａ值为０～１，可分为５组来表示不同级别的一致性：０．０～０．２０为极低的一致性，０．２１～０．４０为一般的一致性，０．４１～０．６０为中等的一致性，０．６１～０．８０为高度的一致性，０．８１～１

几乎完全一致。２　结果

２．１　符合率和准确度　２种方法检测胆红素（直接胆红素）、葡萄糖、蛋白质（清蛋白）３个项目的总符合率分别为９６．６％、９９％、９４％，准确度符合ＭＥＤＩ⁃ＴＡＰＥＵＣ⁃１１Ａ说明书的要求（≥９０％），见表３。

葡萄糖

蛋白质（清蛋白）

表３　各项目标准参考液浓度符合率和准确度

项目１＋２＋３＋４＋＋－

ＵＣ⁃３５００结果

１９／２０１９／２０２０／２０ＮＡ

≥９０５８（９６．６）合格

ＮＡ

胆红素（直接胆红素）

ＮＡ

参考液浓度（μｍｏｌ／Ｌ）

１７．８３３．９ＮＡ８．７

ＵＣ⁃３５００结果参考液浓度（ｍｍｏｌ／Ｌ）

１９／２０２０／２０２０／２０２０／２０２０／２０

≥９０９９（９９）合格

２．６６５．３２１３．６１５４．１８２６．７４

ＵＣ⁃３５００结果

１８／２０１８／２０１９／２０１９／２０２０／２０

≥９０９４（９４）合格

参考液浓度（ｇ／Ｌ）

０．１５０．３１．０１０．０３．０

要求符合率（％）总符合率［ｎ（％）］准确度验证结果

　　注：ＮＡ表示２种仪器均为进行检测，１９／２０表示在２０次检测结果中与相应的参考液标示值相符合的结果为１９次，１８／２０表示在２０次检测结果中与相应的参考液标示值相符合的结果为１８次。

２．２　一致性分析　对２０５份尿液样本用２种方法检测胆红素（直接胆红素）、葡萄糖（Ｇｌｕ）、蛋白质０．８４３、０．７４１，说明这３个项目在ＵＣ⁃３５００的半定量结果与ＡＵ５８３１的定量结果之间有较高的一致性。（清蛋白）３个项目，其Ｋａｐｐａ值分别为０．７８８、

３　讨论

　　按ＣＬＳＩＧＰ１６⁃Ａ３文件叙述，尿液干化学分析试带结果有疑问时，应做确证试验，建议采用相同或更高灵敏度或特异度的相同或不同方法来检测同一物质，但采用相同尿干化学试带重复检测不能作为确

·２７２·

临床检验杂志２０２０年４月第３８卷第４期　ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＬａｂＳｃｉ，Ａｐｒ．２０２０，Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．４

证试验［１］。中国临床检验标准化委员会推荐的参考方法：尿蛋白、葡萄糖和胆红素项目是室内质控和室间质评结果合格的生化分析仪检测结果。ＵＣ⁃３５００尿液分析仪在国内已有多家实验室使用，在仪器及配套试纸条的厂家说明书中并无各项目确证物质的说明，除比重外其他检测项目亦无相关确证产品。本文参照中国临床检验标准化委员会推荐的参考方法对尿蛋白、葡萄糖和胆红素３个项目进行准确性验证，被验证的项目各等量级符合率均≥９０％，准确性验证结果均符合试剂说明书的要求。２种方法尿液中蛋白质、胆红素、葡萄糖、蛋白质均有较高的一致性，３个项目的Ｋａｐｐａ值分别为０．７８８、０．８４３、０．７４１。ＩＳＯ１５１８９医学实验室认可相关条款中要求对尿液分析仪进行性能验证。在日常工作中为确保检验结果的准确性应该进行准确度验证或方法学比较，也可以和其他检测系统（或方法）进行一致性分析［２⁃３］。

综上所述，ＵＣ⁃３５００尿液分析仪和ＡＵ５８３１生

测结果均有较高的一致性，在日常工作中需要对尿液干化学分析仪进行准确度验证时，可用溯源性较好的生化检测系统制备相应的标准参考液作准确度验证，可作为无标准参考液时替代方案。目前国内外并未针对尿干化学分析出台统一的性能验证标准或者指南，关于检测项目准确性的验证方法仍需探讨。４　参考文献

［１］ＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄｌａｂｏｒａｔｏｒｙＳｔａｎｄａｒｄｓＩｎｓｔｉｔｕｔｅ．Ｕｒｉｎａｌｙｓｉｓ；Ａｐｐｒｏｖｅｄ［２］李云飞，马建锋，陈晓婷，等．检测结果一致性评价方法的选择［３］李敏，孙慧颖，胡滨，等．溯源至相同标准物质的２种前清蛋白

２０１７，３５（９）：７０４⁃７０６．

［Ｊ］．临床检验杂志，２０１５，３３（８）：６２２⁃６２４．

Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ⁃ＴｈｉｒｄＥｄｉｔｉｏｎ：ＧＰ１６⁃Ａ３［Ｓ］．Ｗａｙｎｅ，ＰＡ：ＣＬＳＩ，２００９．

测量系统检测结果的正确性和一致性观察［Ｊ］．临床检验杂志，

（收稿日期：２０１９⁃０９⁃１９）（本文编辑：刘群）

化分析仪２种方法尿液中蛋白质、胆红素、葡萄糖检

·读者·作者·编者·

作者更正

　　《临床检验杂志》２０２０年第１期《环介导等温扩增技术检测呼吸道样本中肺炎克雷伯菌》一文因作者疏漏，产生错误。现作如下更正：文中甜菜碱浓度优化试验的甜菜碱浓度单位应均为ｍｏｌ／Ｌ，非ｍｍｏｌ／Ｌ。

研究》一文作者张立平为该论文的共同第一作者和共同通信作者，特此更正。

《临床检验杂志》２０１８年第１０期《类风湿关节炎患者血清长链非编码ＲＮＡＨＯＴＡＩＲ、ＸＩＳＴ和Ｈ１９表达